[发明专利]醒脑静注射液GCMS指纹图谱的测定方法及其标准指纹图谱

说明书

本发明涉及一种醒脑静注射液气质指纹图谱的测定方法及其标准指纹图谱，所述测定方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液制备：精密移取醒脑静注射液5～10mL，通过C18固相萃取小柱；收集洗脱液于1～5ml容量瓶中，加有机溶剂至刻度线，即得；(2)对照品溶液的制备：称取樟脑、龙脑、β‑榄香烯、莪术酮、吉马酮、莪二酮、莪术双环烯酮、麝香酮对照品加入有机溶剂制成浓度已知的溶液，即得；(3)测定方法：吸取对照品溶液与供试品溶液注入气质联用仪，测定，并记录色图谱。

技术领域

本发明涉及中药指纹图谱分析方法，具体涉及醒脑静注射液气质指纹图谱测定方法，及其所得到的醒脑静注射液气质指纹图谱。

技术背景

醒脑静注射液始于上世纪70年代中期，为“安宫牛黄丸”(《温病条辨》，清代吴鞠通) 的减味方，由麝香(7.5g)、郁金(30g)、冰片(1g)、栀子(30g)组成。辅料为聚山梨酯80、氯化钠。具有清热解毒、凉血解毒、开窍醒脑的功效，用于气血逆乱，脑脉瘀阻所致中风昏迷，偏瘫口喎；外伤头痛，神志昏迷；酒毒攻心，头痛呕恶，昏迷抽搐，脑栓塞、脑出血急性期、颅脑外伤，急性酒精中毒见上述症候者。醒脑静注射液的现行质量标准是 2003年的国家药品监督管理局国家药品标准(WS3-B-3353-98-2003)，该标准只对单一指标冰片进行控制，规定其含量不少于0.7mg/ml，对麝香作了麝香酮的薄层色谱鉴别，而对于栀子、郁金中的成分并没有进行质量控制，从而无法保证用药的安全性、有效性。

已发表的醒脑静注射液质量控制文献报道中，一类多为通过气相色谱法或气质联用色谱法测定麝香和/或冰片中的挥发性成分，如麝香酮、龙脑、樟脑等，另一类多为通过高效液相色谱法或紫外分光光度法测定郁金及栀子中的挥发性成分，如莪术酮、莪二酮、吉马酮、异佛尔酮等。

目前并未有同时测定醒脑静注射液中四味药材的成分的文献报道。

基于此，本发明提供了一个气质指纹图谱测定方法，对该注射液成分有一个全面的认识，保证了制剂醒脑静注射液对于四味药材的成分要求，对成分进行鉴别优劣，并同时可以初步的定量，满足质量控制的需求，以期实现制剂的“安全、有效、稳定、可控”。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种醒脑静注射液气质指纹图谱测定方法及其特征指纹图谱。

本发明通过对醒脑静注射液气质指纹图谱的研究，提供了一种更为全面的评价方法，弥补了现有质量控制技术的不足的缺点，补充并完善醒脑静注射液的质量标准，对该药进行全面的质量控制，使其质量控制技术更为完善，也更为科学。

本发明提供一种醒脑静注射液气质联用检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：取醒脑静注射液3～5支，倾出内容物，混匀，精密移取醒脑静注射液5～10mL，通过C18固相萃取小柱；用适量质谱水冲洗；分两次，每次用1～3ml 有机溶剂清洗填料，收集洗脱液于1～5ml容量瓶中，加入过量无水硫酸钠除去多余水分，转移于容量瓶中，用少量有机溶剂洗涤无水硫酸钠，洗涤液一并加入容量瓶，加有机溶剂至刻度线，即得；

(2)测定方法：吸取供试品溶液注入气质联用仪，测定，并记录色图谱；

其中，所述气质联用色谱系统条件如下：以(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱；柱温为程序升温：初始温度为60～80℃，保持2～5分钟，以每分钟10℃的速率升温至 160℃，保持5分钟，继以每分钟6℃的速率升温至200℃，保持2～5分钟；载气为高纯氦气，流速0.8～1.2ml/min；进样口温度250～280℃；四级杆温度150℃；传输线温度250～280℃； Guard chip T：track oven；Bus chip T：210～250℃；分流进样，分流比15:1；进样量：1μL。

(3)将所得色谱图和标准指纹图谱对照，相似度大于0.75为合格品，相似度评价采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》进行评价。