[发明专利]合成核酸药物偶联物的方法

权利要求书

1.一种制备核酸药物偶联物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(a)提供第一引物，所述第一引物的结构如式I所示，

(X1)_n-X2(I)，

式中，“-”为化学键或连接元件，

X1为药物分子，

X2为匹配区，所述匹配区与待扩增的核酸完全互补，

n为≥1的正整数；

(b)在一扩增体系中，以所述待扩增的核酸为模板，用所述的第一引物进行核酸扩增，从而获得核酸扩增产物；以及任选地

(c)对步骤(b)中所述的核酸扩增产物，除去反义链，得到所述的核酸药物偶联物。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述n为1-10，较佳地n为1-8，更佳地n为1-4。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，各X1独立地为选自下组的药物分子：核酸类似物、碱基类似物、生物碱、中药提取物、小分子抑制剂、或其它药物分子。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，n个药物分子X1以串联的形式共价连接在引物上；或n个药物分子X1各自独立地共价修饰连接在所述引物上。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，各X1独立地所述药物分子为MMAE、喜树碱、或酪氨酸激酶抑制剂。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸药物偶联物为核酸适体药物偶联物，较佳地为单特异核酸适体药物偶联物、双特异核酸适体药物偶联物、或多特异核酸适体药物偶联物。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中包括将(X1)_n修饰或合成于所述匹配区的5’端，较佳地通过固相合成或PCR合成。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)的扩增体系中还包括第二引物，所述第二引物为正常引物或带有标记物的引物。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二引物中的标记物为生物素。

10.一种用于制备核酸药物偶联物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有容器，以及位于容器内的：

(a)第一引物，所述第一引物的结构如式I所示，

(X1)_n-X2(I)，

式中，“-”为化学键或连接元件，

X1为药物分子，

X2为匹配区，所述匹配区与待扩增的核酸完全互补，

n为≥1的正整数；

(b)待扩增的核酸；以及任选的

(c)用于核酸扩增的其它试剂。