[发明专利]一种检测试剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201811412591.8 | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN109580934B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 汪柯孜;唐灿 | 申请(专利权)人: | 深圳天辰医疗科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N21/76 |
代理公司: | 深圳中一联合知识产权代理有限公司 44414 | 代理人: | 李艳丽 |
地址: | 518000 广东省深圳市坪山区龙田街道*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 试剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种检测试剂,其特征在于,包括:酶标抗体聚合物;
所述酶标抗体聚合物包括:酶标抗体至少两个,以及碳桥;所述碳桥联接任意两个或以上、相邻或不相邻的所述酶标抗体,且所述碳桥上具有用于联接所述酶标抗体的联接位点,所述联接位点至少两个;
所述酶标抗体包括检测抗体和偶联于所述检测抗体的标记酶,所述联接位点联接检测抗体和/或所述标记酶;所述检测试剂还包括第一试剂,所述第一试剂包括:丝胶蛋白、氯化镁、氯化锌、防腐剂和缓冲液;或,丝胶蛋白、牛血清白蛋白、防腐剂和缓冲液;
在所述第一试剂中,所述丝胶蛋白的质量百分比含量为0.05%~5%,所述氯化镁的工作浓度为4~6mM,所述氯化锌的工作浓度为0.5~1.5mM,所述防腐剂的质量百分比含量为0.05%~1%;所述牛血清白蛋白百分比含量为0.05%~5%;其中,所述缓冲液中的活性成分的工作浓度为20mM;
所述酶标抗体聚合物与所述第一试剂混合,且所述酶标抗体聚合物的浓度为0.1~3ug/mL;
所述碳桥的碳个数为5~15个,一分子酶标抗体聚合物中的酶标抗体的个数为2~10个。
2.根据权利要求1所述的检测试剂,其特征在于,所述碳桥为直链的碳链结构或支链的碳链结构,且所述联接位点位于所述碳桥的端部;和/或
所述碳桥通过所述联接位点以酰胺键与所述检测抗体和/或所述标记酶联接。
3.权利要求1或2所述的检测试剂的制备方法,其特征在于,包括:提供交联试剂和酶标抗体,将所述交联试剂与所述酶标抗体在溶液中进行反应,制备酶标抗体聚合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述交联试剂为同型双功能交联剂;和/或
所述反应的pH为7~9。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述同型双功能交联剂选自二(磺基琥珀)辛二酸或其衍生物。
6.一种微量生物小分子的检测方法,其特征在于,包括:
S021、提供待测样品和磁分离试剂,将权利要求1或2所述的检测试剂与待测样品、磁分离试剂进行反应,得到复合物;
S022、提供化学发光底物,将所述化学发光底物与复合物混匀,进行化学发光反应,并采用发光检测仪检测发光强度,计算待测样本中微量生物小分子的含量。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述磁分离试剂包括:抗体包被的磁微粒;或,包括:链霉亲和素包被的磁微粒,以及生物素标记的抗体。
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