[发明专利]一种检测试剂及其制备方法和应用

说明书

本发明属于体外检测技术领域，具体涉及一种检测试剂及其制备方法和应用。本发明所提供的检测试剂，包括：酶标抗体聚合物；酶标抗体聚合物包括：酶标抗体至少两个，以及碳桥；碳桥联接任意两个或以上、相邻或不相邻的酶标抗体；酶标抗体包括：检测抗体和偶联于检测抗体的标记酶，碳桥上具有用于联接检测抗体和/或标记酶的联接位点，联接位点至少为两个。本发明的检测试剂为由多个酶标抗体通过碳桥联接形成酶标抗体聚合物，对待测样品中的微量抗原进行化学发光法检测时，酶标抗体聚合物含多个检测抗体，可增强本发明检测试剂捕获抗原的敏感度，且与抗原间接连接的标记酶数量增多，酶催化化学发光底物的作用增大，反应信号值得到放大，改善检测灵敏度。

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体涉及一种检测试剂及其制备方法和应用。

背景技术

发光免疫分析法是基于抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种技术手段，具有灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害等优点，目前主要以化学发光法和电化学发光法为主。电化学发光免疫测定法(Elecsys)发展于1996年，是继放射免疫、酶免疫、化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术，在发光反应中加入了电化学反应，是电化学和免疫测定相结合的产物。但是，电化学发光成本较为昂贵，其产品走高端线路，高昂的价格对使用的医疗机构和患者带来了明显的经济压力。

相对于电化学发光法，化学发光法具有明显的价格优势，且其具有灵敏度高、检测线性范围宽、操作简便，自动化程度高等优势，被广泛应用于维生素、免疫球蛋白及酶类等微量生物分子的体外检测。化学发光法(CLIA)是在酶联免疫分析法基础上发展起来的一种免疫检测技术，化学发光法的测定原理与酶联免疫中的双抗体夹心法和竞争法相似，当样本中的待测生物磁微粒试剂和酶标抗体结合形成夹心复合物后，其在磁场作用下通过利用磁微粒的磁性吸附到反应管壁，通过洗涤去除未结合物，然后加入化学发光底物，检测相对发光强度(RLU)，样本中的待测生物分子和检测到的RLU成正比。然而，相对电化学发光来说，化学发光法的检测灵敏度较差。因而，如何提高化学发光法的检测灵敏度，是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种检测试剂，旨在解决现有化学发光法检测灵敏度较差的技术问题。

本发明的另一目的在于提供本发明检测试剂的制备方法，以方便高效地制备本发明检测试剂。

本发明的又一目的在于提供一种微量生物小分子的检测方法，旨在提供一种通过采用本发明检测试剂来检测待测样品中的微量生物分子的化学发光法。

为了实现上述发明目的，本发明的一方面，提供了一种检测试剂，包括：酶标抗体聚合物；所述酶标抗体聚合物包括：酶标抗体至少两个，以及碳桥；所述碳桥联接任意两个或以上、相邻或不相邻的所述酶标抗体，且所述碳桥上具有用于联接所述酶标抗体的联接位点，所述联接位点至少两个；

所述酶标抗体包括检测抗体和偶联于所述检测抗体的标记酶，所述联接位点联接检测抗体和/或所述标记酶。

与现有技术相比，本发明的检测试剂为由多个酶标抗体通过碳桥联接形成酶标抗体聚合物，当采用本发明的检测试剂对待测样品中的微量生物分子进行化学发光法检测时，酶标抗体聚合物具有多个检测抗体，可增强本发明检测试剂捕获抗原的敏感度，增强灵敏度；而且，在复合物中，与抗原间接连接的标记酶数量增多，酶催化化学发光底物的作用增大，使得化学发光法的反应信号值得到放大，进一步地增强了检测灵敏度。

本发明的另一方面，提供了一种上述检测试剂的制备方法，包括：提供交联试剂和酶标抗体，将所述交联试剂与所述酶标抗体在溶液反应，制备酶标抗体聚合物。

在本发明所提供的制备方法中，将交联试剂与多个酶标抗体反应，交联试剂用于提供碳桥，通过碳桥将反应体系中的任意两个或以上酶标抗体联接起来，进而合成酶标抗体聚合物，方法简便快速，可操作性强。

本发明的又一方面，提供了一种微量生物小分子的检测方法，包括：