[发明专利]一种龙葵果总生物碱的制备方法及其用途

说明书

本发明涉及一种龙葵果总生物碱提取物的制备方法，及其在制备治疗白血病药物中的用途。

技术领域

本发明涉及生物碱提取物及其制备方法和在制备治疗白血病的药物中的用途，属于天然药物技术领域。

背景技术

龙葵果为茄科茄属植物龙葵(Solanum nigrum L.)的果实。据记载，在维药中龙葵果具有调血解毒、清热止渴、收敛消肿之功效，临床上常与其它中药组合应用发挥抗癌和抗炎作用^[1-2]。龙葵果在全国均有分布，资源丰富，甾体生物碱含量高，具有潜在的开发价值。

龙葵果主要含甾体生物碱、甾体皂苷、花色苷、多糖类等成分。其中甾体生物碱澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量极高^[3]。近些年以澳洲茄碱、澳洲茄边碱为活性成分的甾体生物碱相继开发成制剂进行临床研究。如澳大利亚学者Cham B. E.从魔鬼苹果（Solanum linnaeanum）中制备得到甾体生物碱混合物BEC001，开发为乳膏剂Curaderm BEC5用于治疗非黑色素瘤皮肤癌^[4-5]。Solbec制药公司开发的产品coramsine/SBP002由1:1的澳洲茄碱和澳洲茄边碱组成，注射给药来治疗黑色素瘤和转移性肾细胞癌^[6]。台湾德英生物科技股份有限公司从黄水茄（Solanum incanum）中得到水溶性萃取物，开发成凝胶制剂SR-T100治疗日光性角化病以及鳞状细胞原位癌^[7]。大量文献也报道澳洲茄碱、澳洲茄边碱体内外显示很强的抗肿瘤活性，尤其对肝癌、乳腺癌、肺癌等有潜在的治疗作用^[8-12]。但均未涉及对白血病的作用的相关报道。

一些文献也报道了其中龙葵生物碱的提取方法和药理作用。

CN200610041072揭示龙葵全草或果实，或黄果茄，或澳洲茄用50-90%乙醇提取，提取液浓缩至一定密度，加入酸性溶液，搅拌，过滤，滤液以弱极性或中等极性树脂吸附，（或者乙醇提取液浓缩后先加碱沉淀，沉淀加入酸性溶液溶解后以树脂吸附），先用碱洗或低浓度碱醇洗，再收集50-90%乙醇洗脱液，浓缩至无醇味，加入碱性溶液调pH 8-10，静置，冷藏，搜集沉淀。沉淀干燥后，以有机溶剂溶解，硅胶柱层析，得到含量大于90.0%的澳洲茄边碱提取物。该提取物灌胃和腹腔注射给药对S₁₈₀肉瘤、Hep肝癌移植性肿瘤小鼠有较强的抗肿瘤作用，同时澳洲茄边碱提取物还有一定的抗炎作用。

CN200610041070揭示龙葵全草或果实，或黄果茄，或澳洲茄用50-90%乙醇提取，乙醇提取液浓缩至一定密度，加入酸性溶液，搅拌，过滤，滤液以弱极性或中等极性树脂吸附，（或者乙醇提取液浓缩后先加碱沉淀，沉淀加入酸性溶液溶解后以树脂吸附），先用碱洗或低浓度碱醇洗，再收集50-90%乙醇洗脱液，浓缩至无醇味，加入碱性溶液调pH 8-10，静置，冷藏，搜集沉淀。沉淀干燥后，以有机溶剂溶解，硅胶柱层析，得到含量大于90.0%的澳洲茄碱提取物。该提取物灌胃和腹腔注射给药对S₁₈₀肉瘤、Hep肝癌移植性肿瘤小鼠有较强的抗肿瘤作用，同时澳洲茄碱提取物还有一定的抗炎作用。

CN200810033619揭示龙葵全草或果实用乙醇提取，提取物浓缩后用阳离子交换树脂层析，收集含碱乙醇洗脱部分，回收乙醇得浓缩液，离心分离得沉淀物，水和丙酮洗涤得龙葵提取物。该提取物含有活性成分澳洲茄碱、澳洲茄边碱和刺茄碱。该提取物在40 mg/kg水平上皮下和腹腔给药可以明显降低小鼠肝癌H22、Lewis肺癌组织水平。在10、20 mg/kg水平上可以明显降低正常小鼠和实验性糖尿病小鼠餐后血糖水平，降低哮喘豚鼠血清NO、T-NOS、iNOS水平，对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。