[发明专利]一种磁珠法血浆游离DNA提取试剂盒及提取方法在审
| 申请号： | 201811415357.0 | 申请日： | 2018-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN109371010A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 林程忠;陈荷萍;吴涵;杨呈勇 | 申请（专利权）人： | 广东腾飞基因科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙) 11316 | 代理人： | 赵永伟 |
| 地址： | 528400 广东省中山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 血浆游离DNA 磁珠 裂解结合液 提取试剂盒 游离DNA 磁力架 磁珠法 试剂盒 洗涤液 洗脱液 诊断性检测 基因组DNA 洗涤磁珠 血浆样品 假阳性 混匀 吸附 洗脱 血浆 | ||
1.一种磁珠法血浆游离DNA提取试剂盒，其特征在于，包括以下组分：磁珠、裂解结合液、洗涤液和洗脱液。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解结合液包含三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸、氯化钠、曲拉通X-100、异硫氰酸胍、盐酸胍和异丙醇。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为20-80mmol/L，乙二胺四乙酸的浓度为5-20mmol/L，氯化钠的浓度为50-500mmol/L，曲拉通X-100的浓度为1-10％体积分数，异硫氰酸胍的浓度为1-6mol/L，盐酸胍的浓度为1-8mol/L,，异丙醇的浓度为20-60％体积分数，PH值为3-5。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗涤液包括洗涤液I和II，所述洗涤液I包含盐酸胍、三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸、氯化钠、无水乙醇、异丙醇和曲拉通X-100；
所述洗涤液II包含三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸和无水乙醇。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述洗涤液I中盐酸胍的浓度为1-8mol/L，三羟甲基氨基甲烷的浓度为20-80mmol/L，乙二胺四乙酸的浓度为5-20mmol/L，氯化钠的浓度为50-500mmol/L，无水乙醇的浓度为30-70％体积分数，异丙醇的浓度为20％-50％体积分数，曲拉通X-100的浓度为1-5％体积分数；
所述洗涤液II中，三羟甲基氨基甲烷的浓度为20-80mmol/L，乙二胺四乙酸的浓度为5-20mmol/L，无水乙醇的浓度为30-80％体积分数。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗脱液包含三羟甲基氨基甲烷和乙二胺四乙酸。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述洗脱液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为10-50mmol/L，乙二胺四乙酸的浓度为5-20mmol/L，pH为5-10。
8.一种提取血浆游离DNA的方法，其特征在于，使用权利要求1-7中任一项所述的试剂盒进行提取，包括以下步骤：
S1：向血浆样品中加入所述磁珠和裂解结合液，混匀后静置5-10min，在磁力架上弃掉溶液；
S2：使用所述洗涤液洗涤磁珠，在磁力架上弃掉溶液；
S3：使用所述洗脱液洗脱磁珠上吸附的DNA。
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