[发明专利]一种酪氨酸酶前体与编码基因及其制备与应用

权利要求书

1.一种酪氨酸酶前体基因，其核苷酸序列的特征为如下特征：

编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列。

2.按照权利要求1所述的酪氨酸酶前体基因，其特征在于：

序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列。

3.一种权利要求2所述的酪氨酸酶前体基因编码的酪氨酸酶前体，其特征在于：序列表中SEQ ID NO.2从氨基端开始的第1-647位氨基酸残基序列。

4.一种权利要求3所述的酪氨酸酶前体的制备方法，其特征在于：将酪氨酸酶前体基因克隆入重组表达载体，和分子伴侣共表达载体一同导入宿主细胞，获得重组表达的酪氨酸酶前体。

5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：

编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

所述的重组表达酪氨酸酶前体的表达载体，是指大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体、或哺乳动物细胞表达载体中的一种或二种以上；

所述的分子伴侣共表达载体，是指pG-KJE8、pGro7、PkJE7、pG-Tf2、pTf16中的一种或二种以上。

6.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：所述宿主细胞，即用于重组表达酪氨酸酶前体的重组菌或转基因细胞系，是指

大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、放线菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞，哺乳动物细胞中的一种。

7.按照权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述大肠杆菌宿主细胞为Escherichia coli BL21、Escherichia coli JM109、Escherichia coli DH5α；

所述酵母菌宿主细胞为Saccharomyces cerevisiae、Pichiapastoris、Kluyveromyces lactis；

所述枯草杆菌宿主细胞为Bacillus subtilis R25、Bacillus subtilis 9920；

所述乳酸菌宿主细胞为Lactic acid bacteria COCC101；

所述放线菌宿主细胞为Streptomyces spp.；

所述丝状真菌宿主细胞为Trichodermaviride、Trichodermareesei、Aspergillusniger、Aspergillusnidulans；

所述昆虫细胞为Bombyxmori、Antharaea eucalypti；

所述哺乳动物细胞为中国仓鼠卵巢细胞CHO、幼小仓鼠肾脏细胞BHK、中国仓鼠肺细胞CHL。

8.一种权利要求3所述的酪氨酸酶前体在催化单酚、 获得邻双酚和苯醌以及催化邻双酚、 获得苯醌中的应用；

1）所述单酚为苯酚、3，4-二甲基苯酚、4-乙基苯酚、4-叔丁基苯酚、2，4-二甲基苯酚、2，3，5-三甲基苯酚和2-氟-4-甲基苯酚中的一种；

2）所述邻双酚为L-Dopa和4-叔丁基邻苯二酚中的一种。