[发明专利]一种鉴定间充质干细胞纯度的方法在审
申请号: | 201811424909.4 | 申请日: | 2018-11-27 |
公开(公告)号: | CN109342739A | 公开(公告)日: | 2019-02-15 |
发明(设计)人: | 柴勋;杨娟;吴国祥 | 申请(专利权)人: | 上海科医联创生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569 |
代理公司: | 宁波鄞州全方专利商标事务所(普通合伙) 33242 | 代理人: | 楼瑜舟;刘永斌 |
地址: | 201203 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 间充质干细胞 种鉴定 特异性指标 脐带间充质干细胞 成纤维细胞 传统检测 方法使用 纤维细胞 种特异性 蛋白 鉴别 污染 应用 | ||
1.一种特异性蛋白的应用,其特征在于,所述特异性蛋白为TM4SF1,所述TM4SF1用于鉴定间充质干细胞纯度的应用。
2.根据权利要求1所述的一种特异性蛋白的应用,其特征在于,所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。
3.一种鉴定间充质干细胞纯度的方法,其特征在于,所述鉴定间充质干细胞纯度的方法使用TM4SF1作为特异性指标。
4.根据权利要求3所述的一种鉴定间充质干细胞纯度的方法,其特征在于,所述鉴定间充质干细胞纯度的方法使用CD105、CD90、CD79a、CD45、CD34、CD14、HLA-DR、CD73、CD44和TM4SF1对应的荧光抗体。
5.根据权利要求4所述的一种鉴定间充质干细胞纯度的方法,其特征在于,所述鉴定间充质干细胞纯度的方法步骤如下:
1.将鉴定间充质干细胞加入15ml离心管中,加入生理盐水,离心;
2.弃上清,重复上术步骤1,3次;
3.计数后弃上清,加入适量PBS调整细胞悬液终浓度为1×107cells/ml;
4.将细胞悬液转移至上样管中,并标记所用的抗体名称和荧光素;
5.按照上样管标记,分别加入适量对应的荧光抗体:CD105,CD90,CD79a,CD45,CD34,CD14,HLA-DR,CD73,CD44,TM4SF1,冰上避光孵育;
6.用PBS清洗细胞2次,离心,吸去上清;
7.加入PBS重悬细胞;
8.上流式细胞仪检测并分析数据。
6.根据权利要求5所述的一种鉴定间充质干细胞纯度的方法,其特征在于,所述分析数据中间充质干细胞具有TM4SF1。
7.TM4SF1的应用,其特征在于,TM4SF1作为鉴别间充质干细胞方法中的表面标志物的应用。
8.鉴别间充质干细胞的方法,其特征在于,所述方法使用TM4SF1作为鉴别间充质干细胞方法中的表面标志物。
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