[发明专利]一种鉴定间充质干细胞纯度的方法

说明书

本发明提供了一种鉴定间充质干细胞纯度的方法,还提供了一种特异性蛋白的应用以及鉴别间充质干细胞的方法。本发明提供的一种鉴定间充质干细胞纯度的方法，该鉴定间充质干细胞纯度的方法使用TM4SF1作为特异性指标。本发明选用TM4SF1在间充质干细胞上表达，在成纤维细胞上不表达，从而能鉴定间充质干细胞中是否有成纤维细胞的污染；TM4SF1跟传统检测方法结合后，作为一个特异性指标，能评价脐带间充质干细胞的纯度过程。

技术领域

本发明属于细胞生物学领域，特别涉及间充质干细胞的鉴定。

背景技术

间充质干细胞(Mesemchemal stem cells,MSC)由Friedenstein首先发现于骨髓中^[1]。 随后，在人体的其他组织中也陆续发现了MSC，如脂肪[Gruber HE,Deepe R,Hoelscher GL, Ingram JA,Norton HJ,Scannell B,Loeffler BJ,Zinchenko N,HanleyEN,Tapp H.Human adipose-derived mesenchymal stem cells:direction to aphenotype sharing similarities with the disc,gene expression profling,andcoculture with human annulus cells.Tissue Eng Part A 2010； 16:2843-2860.]、胎盘[In’t Anker PS,Scherjon SA,Kleijburg-van der Keur C,de Groot-Swings GM,Claas FH,Fibbe WE,Kanhai HH.Isolation of mesenchymal stem cells of fetal ormaternal origin from human placenta.Stem Cells 2004；22:1338-1345.]、脐带[Li W,Ye B,Cai X-Y,Lin J-H,Gao W-Q.Differentiation of Human Umbilical CordMesenchymal Stem Cells into Prostate-Like Epithelial Cells In Vivo.PLoS ONE2014；9(7):e102657.]、牙髓 [Ponnaiyan D,Bhat KM,Bhat GS.Comparison ofimmunophenotypes of stem cells from human dental pulp and periodontalligament.Int J Immunopathol Pharmacol 2012；25:127-134.] 脐血[Erices A,CongetP,Minguell JJ.Mesenchymal progenitor cells in human umbilical cord blood.Br JHaematol 2000；109:235–42.]等。由于MSC具有多向分化与旁分泌作用，这使 得它成为再生医学的理想细胞材料。目前，对于MSC尚无明确的表面标志物，根据2013 年国际细胞治疗协会(The International Society of Cellular Therapy,ISCT)的声明[Dominici M,LeBlanc K,Mueller I et al.Minimal criteria for defining multipotent mesenchymalstromal cells.The International Society for Cellular Therapy positionstatement.Cytotherapy 2006；8:315–317.]，MSC应满足如下条件：1.在标准培养基条件下具有粘附塑料的特性； 2.表达CD105，CD90和CD73,且不表达CD14或CD11b、CD79a或CD19,CD34、CD45、 HLA-DR；3.在体外能分化成骨，成脂和成软骨[M.Krampera,J.Galipeau,Y.Shi,K.Tarte, and L.Sensebe,Immunological characterization of multipotentmesenchymal stromal cells—the International Society for Cellular Terapy(ISCT)working proposal.Cytotherapy 2013,15: (9)1054–1061.]。