[发明专利]一种普鲁兰酶突变体及其应用有效

专利信息
申请号: 201811426687.X 申请日: 2018-11-27
公开(公告)号: CN109355276B 公开(公告)日: 2020-08-04
发明(设计)人: 周哲敏;周丽;闫勤;崔文璟;刘中美;庞博 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/44 分类号: C12N9/44;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/04
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 普鲁兰酶 突变体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述酶突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQID NO.1的普鲁兰酶第419位赖氨酸突变为精氨酸;

或,同时将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的普鲁兰酶第419位赖氨酸突变为精氨酸、第102位酪氨酸突变为半胱氨酸、第383位氨基酸赖氨酸突变为半胱氨酸。

2.根据权利要求1所述的普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述普鲁兰酶的来源为Anoxybacillus sp.WB42。

3.编码权利要求1所述普鲁兰酶突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的载体。

5.制备权利要求1所述普鲁兰酶突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)在普鲁兰酶氨基酸序列上确定突变位点;设计定点突变的突变引物,以携带普鲁兰酶基因的载体为模板进行定点突变;构建含突变体的质粒载体;

(2)将突变体质粒转化进宿主细胞;

(3)挑选阳性克隆进行发酵培养,分别纯化普鲁兰酶突变体。

6.携带权利要求3所述基因或权利要求4所述载体的宿主细胞。

7.如权利要求6所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。

8.权利要求1所述的普鲁兰酶突变体在淀粉糖化中的应用。

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