[发明专利]一种普鲁兰酶突变体及其应用有效
申请号: | 201811426687.X | 申请日: | 2018-11-27 |
公开(公告)号: | CN109355276B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 周哲敏;周丽;闫勤;崔文璟;刘中美;庞博 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/44 | 分类号: | C12N9/44;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/04 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 普鲁兰酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述酶突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQID NO.1的普鲁兰酶第419位赖氨酸突变为精氨酸;
或,同时将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的普鲁兰酶第419位赖氨酸突变为精氨酸、第102位酪氨酸突变为半胱氨酸、第383位氨基酸赖氨酸突变为半胱氨酸。
2.根据权利要求1所述的普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述普鲁兰酶的来源为
3.编码权利要求1所述普鲁兰酶突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的载体。
5.制备权利要求1所述普鲁兰酶突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)在普鲁兰酶氨基酸序列上确定突变位点;设计定点突变的突变引物,以携带普鲁兰酶基因的载体为模板进行定点突变;构建含突变体的质粒载体;
(2)将突变体质粒转化进宿主细胞;
(3)挑选阳性克隆进行发酵培养,分别纯化普鲁兰酶突变体。
6.携带权利要求3所述基因或权利要求4所述载体的宿主细胞。
7.如权利要求6所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。
8.权利要求1所述的普鲁兰酶突变体在淀粉糖化中的应用。
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