[发明专利]子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立方法

说明书

本发明公开了子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立方法，首先建立EMs肾虚血瘀证SD大鼠模型，包括以下步骤：正常饲养一周后，按2∶1比例与3月龄SD雄性大鼠交配，妊娠第3天开始至妊娠第12天灌服羟基脲蒸馏水溶液，研粉溶于蒸馏水中灌服，研粉溶于蒸馏水中灌服，造成孕鼠流产；流产后大鼠阴道出血干净次日开始，每日14：00开始分批置入木桶，以木棒拔打强迫其不断游泳直到疲劳，游泳后捞出实验大鼠；无菌条件下麻醉大鼠，剥离子宫内膜，将上皮层反向对着体壁，关腹，4周后随机取3只大鼠再次剖腹切取移植物送检，验证其已成活。本发明建立EMs肾虚血瘀证SD大鼠模型，使得中医证候实验动物造模易于控制，提供了准确而有效的鉴定证候特征的途径。

技术领域

本发明涉及生命科学技术领域，特别涉及子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立方法。

背景技术

作为近代生命科学发展必不可少的手段，动物实验已广泛渗透入中医基础医学和临床医学各个领域。中医动物模型的研制是在中医学整体观念及辨证论治思想指导下，运用藏象学说和病因病机理论，把人类病证原型的某些特征在动物身上加以模拟而成。标准化中医动物模型的复制是推动中医药现代化的重要环节，对中医药事业的发展具有重要的意义。

但目前存在的主要问题是：中医证候实验动物造模不易控制，或直接引用疾病造模方法，缺少准确而有效的鉴定证候特征的途径，给中医临床诊断、疗效评定、新药开发以及国际间交流等造成诸多困难。有学者提出：证候模型动物是可以实现四诊的，而且部分四诊指标是可以标准化、客观化、计量化采集和分析的，这样的四诊信息是可以用于辨证和辨证论治。

发明内容

发明的目的在于提供子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立方法，本发明从中医病因学和自体内膜移植法入手，建立EMs肾虚血瘀证SD大鼠模型，通过对其宏观表征与微观指标，综合分析动物模型的可靠性，本发明的这种SD大鼠造模方法既以中医理论为指导，又可以用科学的实验方法去实现，使得中医证候实验动物造模易于控制，提供了准确而有效的鉴定证候特征的途径，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立方法，准备3月龄雌性SD大鼠，体重200g左右，EMs肾虚血瘀证大鼠每日进行阴道细胞涂片检查，首先建立EMs肾虚血瘀证SD大鼠模型，包括以下步骤：

步骤1：堕胎伤肾：正常饲养一周后，按2∶1比例与3月龄SD雄性大鼠交配，妊娠第3天开始至妊娠第12天灌服羟基脲蒸馏水溶液，妊娠第12天灌服米非司酮1次，羟基脲动物给药量为每天每百克体重20mg，研粉溶于蒸馏水中灌服，米非司酮动物给药量为每天每百克体重375mg，研粉溶于蒸馏水中灌服，造成孕鼠流产；

步骤2：产后失于调摄：流产后大鼠阴道出血干净次日开始，每日14：00开始分批置入水桶内，水温与室温均保持为(10±0.5)℃，以木棒拔打强迫其不断游泳直到疲劳，时间长短存在个体差异，平均为(10±5)min，共3天，游泳后捞出实验大鼠，不予保温措施，任其暴露于空气中自然晾干；

步骤3：房劳伤肾：正常饲养一周后，措施1、2重复一次；

步骤4：自体内膜移植：无菌条件下麻醉大鼠，剖腹切取右侧宫角处1cm长子宫，剥离子宫内膜，剪取两块各约5mm×5mm的内膜组织块，将上皮层反向对着体壁，左右各一缝固在腹壁上，关腹，4周后随机取3只大鼠再次剖腹切取移植物送检，验证其已成活。

进一步地，选择动情周期4～5天者为合格动物。

进一步地，步骤2的水桶直径50cm，高100cm，桶内水深45cm。