[发明专利]工程化改造巨噬细胞及其在脓毒败血症中的应用有效
申请号: | 201811432902.7 | 申请日: | 2018-11-28 |
公开(公告)号: | CN109536454B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 张硌;陆琤;刘慧莹;柏长青;何园;张鹏飞;周晨辰;张鹏;李巍 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院第五医学中心 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/24 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100039 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 工程 改造 巨噬细胞 及其 败血症 中的 应用 | ||
1.表达mIL4蛋白的巨噬细胞在制备用于治疗脓毒败血症和/或急性肺损伤的药物中的应用,其特征在于:制备所述表达mIL4蛋白的巨噬细胞的方法包括如下步骤:使巨噬细胞表达mIL4蛋白,得到表达mIL4蛋白的巨噬细胞;
所述“使巨噬细胞表达mIL4蛋白”为将含有编码mIL4蛋白的基因的重组载体导入巨噬细胞,得到表达mIL4蛋白的巨噬细胞;
所述mIL4蛋白为如下a1)或a2):
a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质;
a2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;
所述重组载体为重组慢病毒载体;
所述方法包括如下步骤:
(1)利用所述重组慢病毒载体和慢病毒包装质粒转染慢病毒包装细胞,培养,获得慢病毒;
(2)将步骤(1)得到的慢病毒感染巨噬细胞,从而获得表达mIL4蛋白的巨噬细胞;
所述巨噬细胞为RAW264.7细胞。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述重组慢病毒载体为将mIL4蛋白的编码基因插入到载体pCDH-MSCV-MCS-EF1α-copGFP-T2A-Puro的多克隆位点之间后得到的重组质粒。
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