[发明专利]一种黄芪拌种剂及其促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法

权利要求书

1.利用黄芪拌种促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法，其特征在于：具体方法为：将黄芪种子与所述黄芪拌种剂按照湿重/g：体积/ml为3：20的比例混合后孵育黄芪种子90分钟，置于含无菌滤纸的培养皿中萌发，待真叶完全展开后，转移至无菌基质中光照培养4周；4周后用20%的PEG6000连续浇灌幼苗3周；

其中黄芪拌种剂，由黄芪内生菌草假单胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02发酵制备而成，具体制备方法为：草假单胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02制备成种子培养物，按照1‰接种量转接于LB液体培养基中，28℃、180 rpm摇床培养过夜, 培养物4℃、8000 rpm离心10 min，收集菌体沉淀；300 mM MgCl₂洗涤菌体沉淀2次后，重新悬浮菌体沉淀于MgCl₂溶液中，并调整OD600至1.0，制备得拌种剂,4℃保存备用。

2.根据权利要求1所述的利用黄芪拌种促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法，其特征在于：所述黄芪内生菌株草假单胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02于2017年11月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.14946，菌种来源于黄芪鲜药材；该菌株为具有吲哚乙酸合成活性的内生菌株。

3.根据权利要求1所述的利用黄芪拌种促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法，其特征在于：所述种子培养物的制备方法为：挑取草假单胞菌菌株，在LB固体平板中划线、28℃培养24-48h，取单菌落继续划线培养1次活化菌株；挑取第二次活化菌株单菌落，转接于LB液体培养基，28℃摇床培养至对数生长晚期，即OD600为1.8～2.0，获得种子培养物。