[发明专利]一种黄芪拌种剂及其促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法

说明书

本发明属黄芪生态种植技术领域，为解决目前黄芪栽培、品质改善的问题，提供一种黄芪拌种剂及其促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法。由黄芪内生菌株草假单胞菌（Pseudomonas poae）菌株KSC02发酵制备而成，具体制备方法为：菌株KSC02制备成种子培养物，转接于LB液体培养基中，28℃、180rpm摇床培养过夜,培养物离心，收集菌体沉淀；300 mM MgCl₂洗涤菌体沉淀2次后，重新悬浮菌体沉淀于MgCl₂溶液中，并调整OD600至1.0，制备得拌种剂,4℃保存备用。提高了胁迫条件下黄芪产量和质量，有望开发为绿色农药，起到提高药材品质与产量、降低化学合成农药和肥料的双重作用。

技术领域

本发明属于黄芪生态种植技术领域，具体涉及一种黄芪拌种剂及其促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法，采用内生菌Pseudomonas poae菌株KSC02拌种，促进干旱胁迫条件下黄芪根生物量和根冠比的增加，以及药用部位根中黄酮类活性成分芒柄花苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的增加。

背景技术

现有研究表明，内生菌通过合成植物生长激素吲哚乙酸（indoleacetic acid,IAA）、利用植物体内乙烯合成前体—1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid, ACC）作为碳源等方式，在植物生长、次生代谢物质合成积累及缓解环境胁迫等方面发挥着积极作用。针对内生菌在药用植物中的作用，国内外学者也进行了探索性研究，如已有研究发现，茅苍术内生细菌荧光假单胞菌具有促进苍术内酯合成与积累的作用；内生菌铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa具有促进牛膝生长的作用；内生真菌Trichoderma atroviride具有促进丹参毛状根生长及丹参酮积累的作用；内生真菌菌株Gilmaniellasp. AL12具有促进苍术倍半萜合成的作用；青蒿内生菌假诺卡氏菌属(pseudonocardia)菌株具有诱导青蒿素合成的作用。挖掘药用植物促生内生菌资源及其促生特征，解决目前中药材栽培中普遍存在的农药残留、药材品质下降等问题，是中药材种植业稳定、持续发展与利用的关键之一。

黄芪来源于豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，属常用补益类大宗药材，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效。鉴于黄芪野生资源的匮乏和全民医疗保健意识的提高，目前市售黄芪多为栽培品。通过分析不同产地黄芪根内生菌群结构与组成，前期研究发现浑源黄芪细菌多样性远高于其他产地黄芪，且存在很多独特的细菌分类单元。进一步挖掘黄芪内生菌资源，应用于黄芪生态种植，对于黄芪种植产业的发展和黄芪资源持续利用具有重要意义。

合成植物激素吲哚乙酸（indoleacetic acid ，IAA）是一大类植物促生菌共有特性之一，该类菌株在生长介质中含有色氨酸时，可以合成IAA并分泌至胞外，进而促进宿主植物的生长。在盐、干旱和土壤过度酸碱胁迫条件下，植物生长会受到抑制。分析胁迫条件下菌株IAA产生特征，选出促进IAA产生的胁迫因子，研究该胁迫因子作用下接种促生菌对宿主植物黄芪生长与活性成分积累特征，挖掘具有缓解环境胁迫、促进植物生长与活性成分积累的有益菌株，将有助于将该菌株应用于黄芪种植业。

发明内容

本发明为了解决目前黄芪栽培、品质改善的问题，提供了一种黄芪拌种剂及其促进黄芪生长和黄芪根黄酮类化合物积累的方法，促进干旱胁迫条件下黄芪品质提高与产量提高。