[发明专利]一种体外诱导iPS细胞向乳腺方向分化的方法及其专用培养基有效
| 申请号： | 201811436493.8 | 申请日： | 2018-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN111235112B | 公开（公告）日： | 2022-12-27 |
| 发明（设计）人： | 丁俊军;刘静馨;赵偲 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 体外 诱导 ips 细胞 乳腺 方向 分化 方法 及其 专用 培养基 | ||
【权利要求书】：
1.体外诱导人iPS细胞定向分化为乳腺细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将人iPS细胞消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接入包括mTeSR培养基和10μM Y27632的iPS细胞维持培养基，培养24 h；
S2.弃去步骤S1的培养基，更换为包括E6培养基、10 ng/mL BMP4、10 μM SB431542和10μM SU5402的分化培养基I培养48 h；细胞进行每天换液；
S3.弃去步骤S2的培养基，重新更换为包括E6培养基、10 ng/mL BMP4、10 μM SB431542的分化培养基II培养细胞9 d，并隔天换液；
S4.弃去步骤S3的培养基，更换为包括MammoCult ™ Human Medium Kit培养基和5ng/mL BMP4的分化培养基III培养细胞6 d，并隔天换液；
S5.弃去步骤S4的培养基，更换为分化培养基IV继续培养细胞14 d，并隔天换液，所述分化培养基IV是MammoCult ™ Human Medium Kit培养基。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，将种子细胞以350,000～400,000细胞/cm2的密度接种于Matrigel包被的培养板，培养24 h获得高密度单细胞层。
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