[发明专利]从蔓菁中提取蛋白质和多糖的方法在审
申请号: | 201811439745.2 | 申请日: | 2018-11-29 |
公开(公告)号: | CN109608514A | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 康跻耀;贺佩;孔英俊;张贵锋 | 申请(专利权)人: | 河北中科汉禧生物科技有限公司;河北中科同创科技发展有限公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C08B37/00 |
代理公司: | 北京辰权知识产权代理有限公司 11619 | 代理人: | 佟林松 |
地址: | 053000 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 弱酸性 分层 清液 冷却 硫酸铵 预处理 硫酸钠饱和溶液 上清液干燥 饱和溶液 缓慢加热 混合溶液 离心处理 打浆 沉淀液 碘乙酸 蜗牛酶 超声 浆料 酶解 透析 盐析 加热 去除 下层 简易 | ||
本发明涉及从蔓菁中提取蛋白质和多糖的方法,包括以下步骤:预处理,将蔓菁打浆、超声制成浆液;酶解,向浆液同时加入蜗牛酶以及碘乙酸,并调节pH至弱酸性;加热,将弱酸性浆液缓慢加热,然后冷却至常温;离心,将冷却完毕的浆料离心处理,获得清液;盐析,再次调节清液的pH至弱酸性,并在适宜温度下,加入硫酸铵饱和溶液和硫酸钠饱和溶液的混合溶液,搅拌均匀并放置分层;蛋白质和多糖的提取,将分层后的下层沉淀液一定温度下多次透析去除盐类,得到蔓菁蛋白质,将上清液干燥得到蔓菁多糖。本发明为从蔓菁中同时提取蛋白质和多糖的简易方法,且蛋白质的平均提取率可达5.5%以上,多糖的平均提取率可达7.9%以上。
技术领域
本发明属于生物材料提取技术领域,特别涉及从蔓菁中提取蛋白质和多糖的方法。
背景技术
蔓菁,为十字花科芸苔属植物蔓菁(BrassicarapaL.)的根或叶,又称芜菁,为常见的食用蔬菜,其味辛、甘、苦,性温,归胃、肝经,可消食下气,解毒消肿。现代研究发现,蔓菁中含有蛋白质、多糖、脂肪、钙、磷、核黄素、烟酸、维生素,以及咖啡酸、阿魏酸等有机酸类化合物,它具有抗菌、抗寄生虫,抑制甲状腺素合成,抗畸变,延缓衰老等作用。蔓菁种类众多,各地所产蔓菁成分往往并不相同,虽然蔓菁中有效成分种类很多,但是尚未被完全利用,缺乏综合利用的方法。
目前对蔓菁提取的研究主要集中与蔓菁多糖和蔓菁水提物方面。经研究发现,蔓菁蛋白质和多糖含量高,且里面含有多种抑制甲状腺素合成和抗畸变的有效成分,但将这两种成份同时高效提取的方法尚无人研究。
发明内容
本发明的目的是为解决以上问题,本发明提供一种能同时提取蔓菁中多糖和蛋白质的方法,即利用简单的的方法实现同时提取两种有益成分,实现蔓菁全果综合利用。
根据本发明的一个方面,提供一种从蔓菁中提取蛋白质和多糖的方法包括以下步骤:预处理,将蔓菁打浆、超声制成浆液;酶解,向浆液同时加入蜗牛酶以及碘乙酸,并调节pH至弱酸性;加热,将弱酸性浆液缓慢加热,然后冷却至常温;离心,将冷却完毕的浆料离心处理,获得清液;盐析,再次调节清液的pH至弱酸性,并在适宜温度下,加入硫酸铵和硫酸钠的混合溶液,搅拌均匀并放置分层;蛋白质和多糖的提取,将分层后的下层沉淀液多次透析去除盐类,得到蔓菁蛋白质,将上清液干燥得到蔓菁多糖。
其中,酶解步骤中,浆液的pH值调节至5~7,蜗牛酶与蔓菁的质量配比为1:300-500,碘乙酸与蔓菁的质量配比为1:800~1500。
其中,盐析步骤中,混合溶液中硫酸铵溶液和硫酸钠溶液的比例为1:1-4,混合溶液与蔓菁的质量比为1:45~60。
其中,盐析步骤中,将上清液的pH值调至4~7,所述适宜的温度为20~40度的环境温度;所述放置分层时间为12~20小时。
其中,所述多次透析为将下层沉淀液在三氢甲基氨基甲烷缓冲液中透析4~6次。
其中,三氢甲基氨基甲烷缓冲液浓度为0.02mol/L-0.10mol/L,所述透析采用的透析袋的截留分子为10-40kDa。
其中,加热步骤的加热温度为40~70℃,加热时间为30-50分钟,冷却的时间为8~13小时。
其中,预处理步骤包括,将蔓菁清洗后,加入重量为蔓菁5-10倍的水,打浆处理;然后在20Hz-40Hz条件下,超声5-15分钟。
其中,预处理步骤包括,加入重量为蔓菁8倍的水,打浆处理;然后在20Hz条件下,超声15分钟。
根据本发明的另一方面,提供该提取方法所获得的蛋白质和/或多糖。
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