[发明专利]一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法

权利要求书

1.一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；

S2、组织分离培养：将选取的种菇，采用组织分离法分离种菇伞盖与菌柄交界处小块菌肉组织，置于培养皿中的基础PDA培养基上，培养一段时间并及时去除遭污染的培养物；

S3、制备母种：用接种针挑选上一步骤中制得的性状优良的组织培养菌种，置于试管中的含杨树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入18～22℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温-80～-50℃保藏，制得野生富硒香菇母种；以质量百分比计，所述混合培养基，其组分包括：杨树叶汁液1.0％～3.0％、富硒营养液0.5％～0.8％、余量为基础PDA培养基；

S4、制备一级种：用接种针挑选上一步骤中制得的野生富硒香菇母种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天，制得一级种；以质量百分比计，所述杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物，其组分包括：杨树叶汁液3.0％～5.0％、富硒营养液0.8％～1.2％、小米粉1.0％～3.0％、余量为基础PDA培养基；

S5、第一次转管培养：用接种针挑选上一步骤中制得的一级种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；

S6、第二次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；

S7、第三次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；

S8、第四次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树树叶粉、杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；

S9、扩展原种：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、米糠、石膏、维生素、水为培养基，接种，广口瓶常规培养，至广口瓶中菌丝发满为止；

S10、制备生产种：选取步骤S9培养的香菇菌种，以杨树木屑、富硒营养液、米糠、石膏、维生素、水为培养基，装袋、灭菌、接种，常规培养，直至菌袋中菌丝发满为止，即制得可应用于杨木木屑袋料栽培大生产的复壮的野生富硒香菇菌种。

2.根据权利要求1所述一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，在S5步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液5.0％～8.0％、富硒营养液1.2％～1.5％、小米粉3.0％～5.0％、余量为基础PDA培养基。

3.根据权利要求1所述一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，在S6步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液8.0％～10.0％，杨树树叶粉3.0％～5.0％，富硒营养液1.5％～1.8％，小米粉5.0％～8.0％，米糠粉2.0％～4.0％，余量为磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素和水。

4.根据权利要求1所述一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，在S7步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液8.0％～10.0％，杨树树叶粉5.0％～8.0％，富硒营养液1.8％～2.2％，小米粉5.0％～8.0％，米糠粉4.0％～8.0％，余量为石膏、维生素、和水。

5.根据权利要求1所述一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，在S8步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树树叶粉10.0％～15.0％，杨树木屑粉8.0％～15.0％，富硒营养液2.2％～2.5％，米糠粉8.0％～12.0％，余量为石膏、维生素、和水。