[发明专利]一种快速繁殖水生植物水鳖优质种苗的方法和应用

说明书

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种快速繁殖水生植物水鳖优质种苗的方法和应用，本发明所述方法由脱毒母本的获得、丛生芽的扩增、生根与完整植株的诱导、壮苗与移栽步骤构成。本发明针对室内人工条件下水鳖的大规模繁殖，不受自然环境因素的限制，通过多重去污消毒手段获得无菌母本，通过MS、蔗糖和激素含量的调整，实现了丛生芽的高效扩繁和发达根系的诱导。采用该技术成本低，见效快，能够在短时间内批量生产规格一致、健壮、脱毒的水鳖优质组培苗。所得种苗可应用于室内水族观赏布景、室外湿地公园建设及大型湿地生态修复工程等，可有效缓解当前我国水鳖种苗市场稀缺问题。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种快速繁殖水生植物水鳖优质种苗的方法和应用。

背景技术

水鳖(Hydrocharis dubia(Bl.)Backer)为水鳖科水鳖属一种多年生浮水植物，叶多漂浮，密集时也有挺出水面，常生长于静水池沼中。水鳖具有较强的水质净化能力，近年来随着中国大量湿地生态修复工程的实施，该植物种苗的市场需求量极大。另外水鳖植株尤其是其叶片具有较高的观赏价值，其叶色翠绿，呈心型或圆形，叶背面有凸起的蜂窝状贮气组织。水鳖花瓣3片，白色。该植物在小型家庭水族观赏布景和大型湿地公园水景设计中也具有很高的地位。

由于水鳖种子很难收集，现有市场所需种苗的获得主要依靠其休眠芽和自然分株繁殖，相关种源采集受季节限制，所得种苗大小往往参差不齐，劳动力成本高而收获效率极低。尤其是现有湿地生境大量丧失的情况下，野生水鳖种源已很难找到。另外，野生水鳖因极易遭受病虫害的侵袭，其叶片多带虫斑，直接移入景观水体和水族缸中时不仅影响观赏效果，还容易引发病菌扩散，危害水体中其它动植物的安全。

迄今国内外未见有关水鳖脱毒苗的培养及其优质种苗大规模人工繁殖的研究与报道。

发明内容

本发明的目的是：提供一种可利用室内人工条件大规模生产水鳖优质种苗的组培快繁方法和应用。

本发明的技术方案：

本发明所提供一种水鳖优质种苗的快繁繁殖和应用方法，包括以下步骤：

(1)脱毒母本的获得

从野外自然湿地中采集水鳖植株少量，剪取带有分蘖芽的茎段，于洗涤液中浸洗0.5～2h后，用自来水冲洗干净。在超净工作室中，用70％～75％乙醇浸泡不超过3min，改用含0.2％～1％有效氯的NaClO溶液或1～5％的H₂O₂消毒液浸泡消毒10s～5min或0.05％～1％的HgCl₂消毒液浸泡消毒1～30min，再用无菌水彻底漂洗干净。将材料进一步切割整理后接种于装有已灭菌培养液①的三角瓶中，并以透气封口膜封口，置于专用组培架上培养。维持平均光照强度1000～5000lx，每日光照8～12h左右，室内温度20～30℃。一个月后挑出有新芽长出且无细菌生长的材料即水鳖脱毒母本。所述培养液①为：1/2～1倍的MS+10～40g/L的蔗糖+0.5～3.0mg/L的细胞分裂素KT或6-BA+0.1～1.0mg/L的生长素IAA或IBA,调pH至5.6～6.2之间。

(2)丛生芽的扩增

取上述步骤1所得水鳖脱毒母本，于无菌操作台上转接入已灭菌的培养液②中。将三角瓶放回原组培架上培养15～30d，待水鳖丛生芽基本长满整瓶时取出，每1～3芽切割分瓶，并继续扩繁。所述培养液②为：1/2～1倍的MS+10～40g/L的蔗糖+0.5～3.0mg/L的细胞分裂素KT或6-BA+0.1～1.0mg/L的生长素IAA或IBA+5～10％的椰子汁,调pH至5.6～6.2之间。

(3)生根与完整植株的诱导