[发明专利]陆地棉转化事件ICR24-397及其特异性鉴定方法有效
申请号: | 201811442261.3 | 申请日: | 2018-11-29 |
公开(公告)号: | CN109355306B | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
发明(设计)人: | 李付广;葛晓阳;王鹏;王晔;秦文强;杨召恩;杨作仁;詹晶晶;鲁丽丽;张雪妍;王玉芬 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/60;A01H1/02;C12Q1/6895 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
地址: | 455000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 陆地棉 转化 事件 icr24 397 及其 特异性 鉴定 方法 | ||
1.用于检测或辅助检测待测植物样品是否为转基因棉花或其后代的方法,包括如下步骤:检测所述待测植物样品的基因组DNA中是否含有DNA片段A,
所述DNA片段A依次由左侧翼序列、外源DNA片段和右侧翼序列组成;
若所述待测植物样品的基因组DNA含有所述DNA片段A,则所述待测植物样品为或候选为所述转基因棉花或其后代;
若所述待测植物样品的基因组DNA不含有所述DNA片段A,则所述待测植物样品不为或候选不为所述转基因棉花或其后代;
所述转基因棉花是通过包括如下步骤的方法培育获得的:
将目的棉花基因组第A09号染色体的第7000726-7000849位之间的大小为122bp的片段替换为外源DNA片段,得到转基因棉花;
所述外源DNA片段为含有csRRM2基因的DNA分子;
所述转基因棉花的纤维品质高于所述目的棉花;
所述外源DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述左侧翼序列如SEQ ID NO.2所示;
所述右侧翼序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于:所述目的棉花为陆地棉CCRI24。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法为如下1)或2):
1)直接测序;
2)用引物对甲和/或引物对乙对待测植物样品的基因组DNA进行PCR扩增,检测扩增产物大小,若引物对甲扩增得到大小为950bp的条带或引物对乙扩增得到大小为800bp的条带,则所述待测植物样品为或候选为所述转基因棉花或其后代;否则,所述待测植物样品不为或候选不为所述转基因棉花或其后代;
所述引物对甲由SEQ ID NO.5所示的单链DNA分子和SEQ ID NO.6所示的单链DNA分子组成;
所述引物对乙由SEQ ID NO.7所示的单链DNA分子和SEQ ID NO.8所示的单链DNA分子组成。
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