[发明专利]陆地棉转化事件ICR24-397及其特异性鉴定方法

说明书

本发明公开了陆地棉转化事件ICR24‑397及其特异性鉴定方法。本发明在陆地棉CCRI24中过表达csRRM2基因，得到转基因棉花ICR24‑397，其为将外源DNA片段插入目的棉花基因组第A09号染色体的第7000726‑7000849位间，替换掉第A09号染色体的第7000726‑7000849位间122bp的碱基序列后得到的棉花。通过试验证明：转基因棉花ICR24‑397不仅纤维长度、比强度、整齐度和籽棉产量高于受体材料，而且株高、叶片长度、叶片宽度、成铃数、单铃重等也均高于受体材料，为培育具有优良纤维品质的转基因棉花的研究奠定基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及陆地棉转化事件ICR24-397及其特异性鉴定方法。

背景技术

转化事件是由外源基因在基因组插入位点的上下游侧翼区和外源基因构成的分子结构。通常，外源基因转化植物可以得到一个转化体群体，这个转化体群体包含大量独立的事件，其中每个事件都是独特的。外源基因在植物中的表达受到外源基因所插入的染色体位置的影响。这可能源自染色质结构或者整合位点附近转录调控元件的影响。相同基因在不同转化事件中的表达水平具有很大的差异，在表达的空间或时间模式上也可能存在差异。而且外源基因的插入也可能会影响内源基因的表达。因此，每个独立转化事件对受体植物的影响都是不同的。获得能有效表达外源基因，同时不影响植株本身农艺性状的植物转化事件在培育转基因作物新品种中具有重要的应用价值。

棉花是我国重要的经济作物，主要种植目的是收获棉花纤维，作为纺织业原料。此外，棉籽油和棉籽蛋白是重要的植物油和蛋白质资源，分别占世界食用植物油和蛋白质总供应量的10％和6％，棉花的短绒、棉籽壳、棉杆、棉酚等都有工业用途。

提高棉花的纤维品质和产量一直以来都是棉花领域的研究重点，一方面由于棉花纤维是自然界中目前已发现的最长的细胞，其为研究细胞伸长调控机制提供了最佳的实验材料；另一方面由于棉花纤维是单细胞凸起形成的，这为研究细胞命运决定提供了便利。此外，长纤维及高产量是纺织工业所期望，也是广大棉花所需要的，因此提高棉花的纤维品质及产量在生产上具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种转基因棉花的培育方法。

本发明提供的转基因棉花的培育方法包括如下步骤：将目的棉花基因组第A09号染色体的第7000726-7000849位之间的大小为122bp的片段替换为外源DNA片段，得到转基因棉花；

所述外源DNA片段为含有csRRM2基因的DNA分子；

所述转基因棉花的纤维品质高于所述目的棉花。

进一步的，所述外源DNA片段包括csRRM2基因表达盒和抗草甘膦基因Epsps表达盒。

所述csRRM2基因全长198bp，编码FCA蛋白，具有提高棉花纤维品质、皮棉产量、促进棉铃、种子增大等功能。所述csRRM2基因表达盒依次包括来自花椰菜花叶病毒的CAMV35S启动子、csRRM2基因和NOS终止子。其中CAMV35S启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第3451-3796位核苷酸所示；csRRM2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第3225-3422位核苷酸所示；NOS终止子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第2949-3201位核苷酸所示。所述csRRM2基因表达盒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第2927-4198位核苷酸所示。