[发明专利]一种基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件及荧光检测方法

权利要求书

1.一种基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：其包括桥联抗体偶联荧光微球和试纸条，所述的试纸条包括衬板，衬板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下横向设置质控线和一条或一条以上的检测线，所述质控线上包被有可结合桥联抗体偶联荧光微球的结合物，所述检测线上包被有与不同待测物对应的各检测物抗原；所述的桥联抗体偶联荧光微球是利用桥联抗体作中间连接层得到的偶联有特异性识别各待检测物的抗体的桥联抗体偶联荧光微球。

2.根据权利要求1所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述的桥联抗体偶联荧光微球包括荧光微球、修饰在荧光微球表面的桥联抗体和与桥联抗体结合的特异性识别待检测物的鼠源性抗体，所述的桥联抗体为抗鼠源性单抗的二抗。

3.根据权利要求1或2所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述的检测线上各检测物抗原的包被量为0.1-0.35μg/cm检测线；所述的待检测物为黄曲霉毒素M1、三聚氰胺小分子或疟疾抗原；与待测物对应的特异性抗体为抗黄曲霉毒素M1、抗三聚氰胺抗体和抗疟疾抗原的抗体。

4.根据权利要求1所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述的检测线为两条，分别包被有黄曲霉毒素M1抗原和三聚氰胺抗原。

5.根据权利要求1或2所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述桥联抗体偶联荧光微球包埋的荧光基团为镧系元素。

6.根据权利要求1或2所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述的质控线上包被有抗鼠源性单抗的二抗或鼠源性单抗，所述质控线上抗鼠源性单抗的二抗或鼠源性单抗的包被量为0.01-0.14μg/cm质控线。

7.根据权利要求1或2所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述的桥联抗体偶联荧光微球上桥联抗体和特异性识别各检测物的抗体的摩尔比为(100-10000)：1。

8.根据权利要求1所述的基于桥联抗体偶联荧光微球的荧光检测器件，其特征在于：所述荧光微球的粒径为500nm-1μm，为聚苯乙烯荧光微球，荧光微球包埋有荧光基团，表面修饰有羧基，所述的荧光微球通过表面羧基和桥联抗体的氨基共价结合，得到微球-桥联抗体偶联物；再加入特异性识别检测物的抗体，桥联抗体和特异性识别检测物的抗体结合，获得荧光微球-桥联抗体-特异性抗体偶联物荧光微球即基于桥联抗体偶联荧光微球，实现特异性抗体在微球上的标记。

9.一种基于桥联抗体偶联荧光微球的检测器件检测待测物含量的方法，包括下步骤：

将修饰有桥联抗体和特异性抗体的桥联抗体偶联荧光微球加入到样品提取液中，插入试纸条，室温反应；

测试试纸条检测线的荧光强度，基于荧光强度-待测物浓度关系曲线，获得待测样品提取液中待测物的含量。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：室温反应时间为10min；所述荧光强度-待测物浓度关系曲线的获得方法：用空白样品液或空白样品提取液加标配制一系列待测物的标准品溶液，在上述加标样品液中加入修饰有桥联抗体和特异性抗体的桥联抗体偶联荧光微球，插入试纸条，反应一段时间后，读取检测线上的荧光强度，以标准品浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制荧光强度-待测物浓度信号响应曲线。