[发明专利]一种mir338基因沉默的脐带间充质干细胞及其制备方法和应用有效
申请号: | 201811447633.1 | 申请日: | 2018-11-29 |
公开(公告)号: | CN109609554B | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 田雨光;岳敏 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/10;A61K35/28;A61P25/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 510515 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 mir338 基因 沉默 脐带 间充质 干细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种mir338基因沉默的脐带间充质干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将目的基因插入慢病毒系统载体中,构建LentiCRISPR v2-mir338重组质粒;
S2.将S1所得LentiCRISPR v2-mir338重组质粒与包装质粒共转染宿主细胞,制备得到慢病毒颗粒;
S3.将S2所得慢病毒颗粒转染脐带间充质干细胞,即得到基因工程化的mir338基因沉默的脐带间充质干细胞。
2.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述慢病毒系统载体为LentiCRISPRv2。
3.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述宿主细胞为293T细胞。
4.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤S2中,所述慢病毒颗粒的MOI指数为10。
5.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤S3中,转染时间为4h。
6.权利要求1~5任一所述制备方法制备得到的基因工程化的mir338基因沉默的脐带间充质干细胞。
7.权利要求1中所述的mir338基因沉默的脐带间充质干细胞在制备治疗脑损伤的制剂中的应用。
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