[发明专利]二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用有效
申请号: | 201811451063.3 | 申请日: | 2018-11-30 |
公开(公告)号: | CN109289760B | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 陈填烽;林智明 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | B01J20/10 | 分类号: | B01J20/10;B01J20/30;B01D15/08 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
地址: | 510632 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 二氧化硅 纳米 粒子 dna 免疫 吸附剂 中的 应用 | ||
1.二氧化硅纳米粒子在制备DNA免疫吸附剂中的应用,其特征在于包括如下步骤:将二氧化硅纳米粒子表面修饰氨基和羧基,再加入催化剂和DNA,反应,得到二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂;
所述的二氧化硅纳米粒子为介孔二氧化硅纳米粒子时,所述的二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂通过如下步骤制备得到:
(1)将介孔二氧化硅纳米粒子分散在有机溶剂中,加入3-氨丙基三乙氧基硅烷,搅拌,反应,离心,得到表面含氨基的介孔二氧化硅纳米粒子;
(2)洗涤步骤(1)获得的表面含氨基的介孔硅纳米粒子分散在有机溶剂中,加入丁二酸酐,反应,离心,洗涤,干燥,研磨,得到含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子;
(3)将步骤(2)获得的含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子分散,加入催化剂,搅拌,加入用于与抗DNA抗体结合的DNA溶液,反应,离心,洗涤,干燥,研磨,得到介孔二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂;
步骤(1)中所述的3-氨丙基三乙氧基硅烷的用量按其与所述的介孔二氧化硅纳米粒子=1~3mL:100mg配比计算;
步骤(2)中所述的丁二酸酐的用量按其与所述的介孔二氧化硅纳米粒子=质量比1~4:1配比计算;
步骤(3)中所述的催化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺中的至少一种;
所述的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的用量按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1~5计算;
所述的N-羟基琥珀酰亚胺的用量按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1~5计算;
步骤(3)中所述的DNA的质量用量按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:10~30计算;
所述的二氧化硅纳米粒子为实心二氧化硅纳米粒子时,所述的二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂通过如下步骤制备得到:
(A)将实心二氧化硅纳米粒子分散在有机溶剂中,加入3-氨丙基三乙氧基硅烷,搅拌,反应,离心,洗涤,得到表面含氨基的实心二氧化硅纳米粒子;
(B)将步骤(A)得到的表面含氨基的实心二氧化硅纳米粒子分散在有机溶剂中,加入丁二酸酐,反应,离心,洗涤,干燥,研磨,得到含羧基修饰的实心二氧化硅纳米粒子;
(C)将步骤(B)得到的含羧基修饰的实心二氧化硅纳米粒子分散,加入催化剂,搅拌,加入用于与抗DNA抗体结合的DNA溶液,反应,离心,洗涤,干燥,研磨,得到实心二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂;
步骤(A)中所述的3-氨丙基三乙氧基硅烷的用量按其与所述的实心二氧化硅纳米粒子=1~3mL:100mg配比计算;
步骤(B)中所述的丁二酸酐的用量按其与所述的实心二氧化硅纳米粒子=质量比1~4:1配比计算;
步骤(C)中所述的催化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺中的至少一种;
所述的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的用量按其与所述含羧基修饰的实心二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1~5计算;
所述的N-羟基琥珀酰亚胺的用量按其与所述含羧基修饰的实心二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1~5计算;
步骤(C)中所述的DNA的质量用量按其与所述含羧基修饰的实心二氧化硅纳米粒子的质量比=1:10~30计算;
所述的DNA为双链DNA。
2.根据权利要求1所述的二氧化硅纳米粒子在制备DNA免疫吸附剂中的应用,其特征在于:所述的介孔二氧化硅纳米粒子通过如下步骤制备得到:以正硅酸乙酯为硅源,十六烷基三甲基溴化铵为表面活性剂,三乙胺为有机溶胀剂,搅拌回流反应,得到介孔二氧化硅纳米粒子;
所述的十六烷基三甲基溴化铵的用量为按其与所述的正硅酸乙酯=1~1.5g:1mL配比计算;
所述的三乙胺的用量按其相当于所述的正硅酸乙酯体积的32~38倍计算。
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