[发明专利]二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用

说明书

本发明公开了二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用。本发明是基于本发明发明人发现二氧化硅纳米粒子负载DNA得到的DNA免疫吸附剂吸附性能好、安全性能更佳的优点所提出的发明创造。本发明提供的二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂是基于前述应用得到的，其分DNA修饰在纳米粒子MSNs和SiO₂的表面或孔道内，固载量大，不易脱落，提高了免疫吸附剂的安全性，且DNA分子与抗ds‑DNA抗体充分接触，可最大限度发挥其特异性结合能力，从而制备得到的免疫吸附剂吸附性能良好、稳定。

技术领域

本发明属于血液净化领域，特别涉及二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种多系统损害的慢性自身性免疫性疾病，确切病因不明，常引起多器官系统的不可逆性损害，可累及皮肤、浆膜、关节、肾及中枢神经系统等，病理表现为自身抗体及免疫复合物沉积，影响患者的寿命和生活质量。SLE的患病率因人群而异，我国患病以女性多见，尤其是育龄女性。患者血清中出现以抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)为代表的多种抗体，其中抗ds-DNA抗体是参与SLE发病的主要抗体，其特异性可达90％，是SLE特异性抗体。

早期清除患者血清中的自身抗体、控制疫病活动、保护肾功能是治疗的关键。免疫吸附疗法是近年来发展起来的新型血液净化技术，它利用吸附材料除去血浆中的致病抗体(如抗ds-DNA抗体)，达到治疗疫病的目的。免疫吸附是通过抗原抗体免疫反应或物理化学作用除去致病因子，主要是血浆吸附，从而避免了离心式和一次膜血浆分离大量丢弃血浆的弊端。近年来，免疫吸附越来越多地应用于免疫性疾病的治疗。

其中，应用比较广泛的是DNA免疫吸附，采用DNA免疫吸附疗法可以特异性的吸附和清除抗ds-DNA抗体，从而对SLE患者进行有效的治疗。欧洲专利EP0272792A1制备了基于活性炭或者碳化树脂的DNA免疫吸附剂，他们以活性炭或者碳化树脂为载体，以小牛胸腺DNA(下文简称DNA)为配基，利用火棉胶包埋固载小牛胸腺DNA。但是，无论是活性炭还是碳化树脂，均存在碳颗粒易脱落的问题，因而使用之前需要增加时间进行充分预冲至无微粒，从而避免治疗时微粒随血液循环进入人体而导致发生血栓、过敏、刺激等严重的不良反应。此外，DNA采用火棉胶包埋方式固载还存在两个缺点：一是部分DNA会由于包埋不充分，在后续生产过程中可能发生脱落，导致DNA固载量下降；二是部分被包埋过深的DNA又无法与抗体接触。因此，提供一种吸附性能好的，微粒脱落率低的DNA免疫吸附剂成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂。

本发明的再一目的在于提供上述二氧化硅纳米粒子负载DNA的免疫吸附剂的制备方法及应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用，是基于本发明发明人发现二氧化硅纳米粒子负载DNA得到的DNA免疫吸附剂，具有吸附性能好，且安全性能更佳的优点。

所述的二氧化硅纳米粒子在DNA免疫吸附剂中的应用，包括如下步骤：将二氧化硅纳米粒子表面修饰氨基和羧基，再加入催化剂和DNA混合，反应，得到DNA免疫吸附剂。

所述的DNA优选为双链DNA；更优选为小牛胸腺DNA。

所述的二氧化硅纳米粒子优选为实心二氧化硅纳米粒子(SiO₂)和介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs)中的一种或至少两种；更优选为介孔二氧化硅纳米粒子。

所述的介孔二氧化硅纳米粒子优选通过如下步骤制备得到：以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源，十六烷基三甲基溴化铵为表面活性剂，三乙胺为有机溶胀剂，搅拌回流反应，得到介孔二氧化硅纳米粒子。