[发明专利]一种糖肽纳米硒溶胶的制备方法

说明书

本发明公开了一种糖肽纳米硒溶胶的制备方法，此法以鲍加工下脚料鲍内脏为原料，采用脂肪酶与蛋白酶联合阶梯酶解、膜分离技术制备糖肽类化合物，以糖肽为模板，利用亚硒酸钠与茶多酚、Vc的反应介导制备一种糖肽纳米硒溶胶。本发明采用具有生物活性的糖肽、茶多酚为稳定剂、还原剂制备纳米硒材料，既能利用糖肽类物质同时具有多羟基、酰胺键的结构特征和糖肽、茶多酚相对温和的还原能力，极大的增强纳米硒溶胶稳定性，又能利用糖肽、茶多酚生理活性强化产品的生物学功能，有利于其在保健/功能食品、生物医药、化妆品等领域的开发应用，同时也为鲍资源高值化利用提供一条有效途径。

技术领域

本发明属于纳米技术领域，特别涉及一种糖肽纳米硒溶胶的制备方法。

背景技术

硒是一种人体必需的微量元素，是构成机体抗氧化酶系统的关键成分，对维持机体的生命活动有重要作用。但硒的营养剂量与可耐受最高摄入量间的范围很窄，致使硒营养补充不易控制。近年来的研究表明，纳米硒毒性很低，是目前毒性最低的硒形式，且具有很高的生物利用率和生物活性。

纳米硒材料制备过程中，纳米颗粒的无序分散、快速团聚、无定形形貌一直是纳米硒制备中要解决的关键技术问题。研究表明，多糖、蛋白质等生物大分子材料可以作为修饰剂，能较有好地使纳米硒微粒均匀分散、防止团聚，且形成特殊的形貌，从而在纳米硒材料的成核、生长微粒形状调控等方面发挥作用。然而，天然多糖、蛋白质物质分子量大，大分子间纠缠作用导致硒溶胶材料存放后期的不稳定，使用多糖或蛋白质仍无法很好解决纳米硒溶胶后期团聚导致的稳定性问题。

鲍内脏是鲍加工过程中产生的下脚料，量极大，但因是非食物资源，通常被废弃，既污染环境，也浪费资源。鲍内脏干物质中，蛋白质含量约50%、糖类约15%、脂质约10%，且作为动物材料，内脏组织中的糖多以结合态的糖蛋白形式存在，通过生物酶解技术对糖蛋白质适度水解，可制备中等分子量的糖肽类物质，同时具有多糖的多羟基结构和蛋白质多肽链的酰胺平面结构特征，且不存在生物大分子的分子间纠缠，对纳米硒能起到极好的稳定效果。目前，使用鲍内脏糖肽类物质制备纳米硒溶胶尚未见文献报道。

发明内容

本发明针对现有纳米硒溶胶制备存在的缺陷，联合使用生物技术与膜分离技术组合工艺，旨在提供一种速度快、处理量大、可连续化操作的糖肽纳米硒溶胶的工业化制备方法。

本发明具体通过以下技术方案实现；

本发明是一种糖肽纳米硒溶胶的制备方法，包括以下步骤：

1) 原料预处理：将冷冻鲍内脏解冻破碎，加水、NaHCO₃混合，在微沸状态下热处理15-25min，降温至60℃以下，料液pH值9.0-10.5；

2）联合阶梯酶解：料液添加碱性脂肪酶和碱性蛋白酶在30-60℃联合酶解，当酶解液的pH值下降到约8.0时，调整物料温度35-55℃，添加胰蛋白酶继续水解。酶解3.0-9.0 hr后，物料加活性碳煮沸灭酶、脱色，经碟式离心机离心，取水相为酶解液；

3）膜分离制备鲍内脏糖肽：酶解液经孔径50-800nm陶瓷膜微滤，滤液先经截留分子量100-150KD超滤膜超滤，超滤透过液再经截留分子量1-10KD超滤膜超滤，得截留液，即为鲍内脏糖肽溶液；

4）鲍内脏糖肽纳米硒溶胶的制备：加水调整鲍内脏糖肽溶液固形物含量，缓慢加入亚硒酸钠溶液，物料缓慢搅拌0.5-4.0hr，然后缓慢加入茶多酚与Vc混合溶液组成制备纳米硒溶胶的反应体系，在20-60℃温度下反应1.0-10.0hr。反应完成后用截留分子量0.5-50KD膜分离脱除未反应的亚硒酸钠，得到的截留液即鲍内脏糖肽纳米硒溶胶。

进一步：

步骤1）中所述的加水量为鲍内脏湿物料重量的8-12倍。