[发明专利]一种微量油茶种仁油脂含量和脂肪酸同时测定的方法

说明书

本发明公开了一种微量油茶种仁中油脂含量和脂肪酸组成同时测定的方法。采用新型的溶剂体系提取了油茶种仁中的油脂成分，同时加入茶油中不含的脂肪酸为内标，采用气相色谱法建立脂肪酸甲酯‑脂肪酸甲酯/内标物的内标标准曲线，通过内标曲线进行计算，总脂肪酸的含量可以折算为油脂含量，单个脂肪酸的含量即为这种脂肪酸的含量，从而确定油茶种仁中的油脂含量和脂肪酸组成。本发明方法可以实现油脂含量和组成的同步测定，尤其对于微量种仁中的油脂的提取具有明显优势，非常适合微量油茶种仁中油脂的精确提取和脂肪酸的准确测定。

技术领域

本发明提供一种微量油茶种仁油脂含量和脂肪酸同时测定的方法。具体涉及一种微量油茶油脂快速提取，甲酯化后GC-MS内标法定量测定油脂含量和组成的测定方法。

背景技术

油茶是我国特有的木本油料树种，广泛分布于我国南方14个省市区，对增加优质食用油供给，维护国家粮油和耕地安全，促进当地经济，帮助林农脱贫致富，改善生态环境具有重要意义，是经济效益、社会效益和生态效益兼备的经济林树种。茶油是油茶的最主要产品，品质优良，被联合国粮农组织作为健康型食用油进行重点推荐。

传统油茶种仁含油率测定主要采用索氏抽提法、核磁共振法、近红外光谱法。索氏抽提法测定结果精度高，但操作繁琐，耗时长，消耗大量试剂。为了保证取样的均一性，一般都是取较大量的油茶仁样品(50g)进行粉碎，混匀后取5g进行索式抽提测定，提取温度一般为65℃，提取时间一般是6h。

核磁共振法要求样品含油率必须控制在2％以内，标样和被测样品必须在同一室温下进行测定；近红外光谱法可以同时检测油分、蛋白质和水分含量等多个指标，但核磁共振法和近红外光谱法都需要利用索氏抽提法测定标准样品的油分含量。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种微量油茶种仁油脂含量和脂肪酸同时测定的方法。

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

所述微量油茶种仁油脂含量和脂肪酸同时测定的方法是采用三元溶剂体系提取油茶种仁中的油脂成分，得到油脂样品，同时加入茶油中不含的脂肪酸为内标，内标物浓度为10g/L(用油脂的提取溶剂配制)，内标物与油茶种仁的体积质量比为(1.5-2.5)mL： 1g，优选为2mL：1g，将油脂样品甲酯化后采用GC-MS内标法，以单个脂肪酸甲酯的浓度为横坐标，以各种脂肪酸甲酯与内标的峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立内标标准曲线，通过内标曲线将总脂肪酸的含量折算为油脂含量，从而确定油茶种仁中的油脂含量和脂肪酸组成。

其中，所述三元溶剂体系选自正己烷-正丁醇-水，二氯甲烷-乙醇-水，二氯甲烷-正丁醇-水溶剂体系中的至少一种。

优选地，所述正己烷-正丁醇-水溶剂体系中正己烷、正丁醇和水的体积比为(3:6:1)-( 6:3:1)；所述二氯甲烷-乙醇-水溶剂体系中二氯甲烷、乙醇和水的体积比为(3:6:1)-(6:3:1)；所述二氯甲烷-正丁醇-水溶剂体系中二氯甲烷、正丁醇和水的体积比为(3:6:1)-(6:3:1)。

优选地，提取油茶种仁中的油脂成分时提取时间为2-10min，提取温度为25-35℃。

优选地，所述内标物选自十一烷酸，十三烷酸、十五烷酸、十七烷酸、十九烷酸或二十一烷酸。

下面对本发明作进一步说明：

本发明包括以下步骤：

1)油茶种仁机械破壁。称取一定质量(10mg≤m≤200mg)干燥到恒重的油茶种仁于MM400冷冻混合球磨仪配套的钢管中，同时加入3颗钢珠，液氮冷却到-20℃后，用冷冻混合球磨仪在10000r/min的条件下震荡破碎2min；