[发明专利]一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法

权利要求书

1.一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)利用HPLC建立C₁₂-二甲基苄基氯化铵的标准工作曲线；

2)在与步骤1)相同条件下用HPLC检测含单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的试样；比对所述试样HPLC图谱中各色谱峰的UV图谱和C₁₂-二甲基苄基氯化铵的UV图谱以确认所述试样中单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物所属色谱峰；然后将所述试样中单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的色谱峰面积代入步骤(1)所得标准工作曲线计算得所述试样中单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的初始浓度；

3)将步骤2)中所得初始浓度代入修正系数矫正得所述试样中单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的最终浓度；

所述修正系数K的计算公式为：

其中，K是浓度修正系数；Ω_{C12二甲基苄基氯化铵}为C₁₂-二甲基苄基氯化铵分子的不饱和度；Ω_{待测目标物}为所述试样中单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的不饱和度；

其中所述单链取代二甲基苄基氯化铵为C₁₄-二甲基苄基氯化铵、C₁₆-二甲基苄基氯化铵和苄索氯铵。

2.根据权利要求1所述的一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法，其特征在于，步骤2)中比对UV图谱具体是比对200nm、218nm和263nm处的特征吸收峰，若所述试样HPLC图谱中特定色谱峰的UV图谱和C₁₂-二甲基苄基氯化铵的UV图谱里三个所述特征吸收峰的重合度在90％以上，即可认为所述特定色谱峰为所述单链取代二甲基苄基氯化铵类化合物的色谱峰。

3.根据权利要求1所述的一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法，其特征在于，步骤1)中所述C₁₂-二甲基苄基氯化铵标准工作曲线浓度范围是10～100mg/L。

4.根据权利要求1所述的一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法，其特征在于，步骤(2)中对试样进行预处理，步骤为：取样品于25mL容量瓶中，加入20mL乙腈涡旋震荡1min，超声提取30min，取出，冷却后用乙腈定容至25mL，混匀，经0.45μm滤膜过滤，得到的滤液即为所述试样。

5.根据权利要求1所述的一种HPLC测定单链取代二甲基苄基氯化铵含量的方法，其特征在于，步骤1)和2)中所述的HPLC条件为：色谱柱为250mm×4.6mm×5μm的岛津CN-3柱，柱温为25～35℃，进样量为5～20μL，流动相为乙腈+0.1mol/L冰醋酸调pH至5.0的醋酸铵缓冲溶液＝60+40，流速0.5～1.0mL/min，检测波长为260nm。