[发明专利]一种聚半乳糖醛酸酶编码基因及酶和制备与应用

权利要求书

1.一种聚半乳糖醛酸酶基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.1的第1-1005位的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

2)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

3)编码序列表中SEQ ID NO.2的第1-335位氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

4)编码序列表中SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

5)对序列表中SEQ ID NO.1的第1-1005位的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有聚半乳糖醛酸酶活性的核苷酸序列；

6)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有聚半乳糖醛酸酶活性的核苷酸序列；

7)与序列表中SEQ ID NO.1的第1-1005位限定的脱氧核糖核酸(DNA)序列的同源性达到80％及以上，且能编码降解果胶多糖的蛋白质的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

8)与序列表中SEQ ID NO.1限定的脱氧核糖核酸(DNA)序列的同源性达到80％及以上，且能编码降解果胶多糖的蛋白质的脱氧核糖核酸(DNA)序列。

2.一种权利要求1所述的聚半乳糖醛酸酶基因编码的聚半乳糖醛酸酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种：

1)序列表中SEQ ID NO.2从氨基端开始的第1-335位氨基酸残基序列；

2)序列表中SEQ ID NO.2氨基酸残基序列；

3)对序列表中SEQ ID NO.2所示的第1-335位氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有聚半乳糖醛酸酶活性的氨基酸序列；

4)对序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有聚半乳糖醛酸酶活性的氨基酸序列。

3.一种权利要求2所述的聚半乳糖醛酸酶的制备方法，其特征在于：将如权利要求1所述的聚半乳糖醛酸酶酶基因克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得重组表达的聚半乳糖醛酸酶。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的重组表达载体选自：大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述宿主细胞，即用于重组表达聚半乳糖醛酸酶的重组菌或转基因细胞系，是指大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、放线菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞，哺乳动物细胞中的一种。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述宿主细胞选自，Escherichia coliBL21、Escherichia coli JM109、Escherichia coli DH5α、Saccharomyces cerevisiae、Pichiapastoris、Kluyveromyces lactis、Bacillus subtilis R25、Bacillus subtilis9920、Lactic acid bacteria COCC101、Streptomyces spp.、Trichoderma viride、Trichodermareesei、Aspergillus niger、Aspergillus nidulans、Bombyxmori、Antharaea eucalypti、中国仓鼠卵巢细胞CHO、幼小仓鼠肾脏细胞BHK或中国仓鼠肺细胞CHL。

7.如权利要求2所述的聚半乳糖醛酸酶在降解果胶多糖，或在降解含有半乳糖醛酸聚糖连接的底物中的应用。