[发明专利]制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法

说明书

本发明提供了一种制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法。所述方法:将朝鲜蓟粉碎后用乙醇水溶液浸提后得到粗提液；粗提液上样至AB‑8型大孔树脂层析柱进行洗脱，经色谱检测，收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到粗提物；粗提物用50％甲醇溶解后上样至RP‑C18层析柱进行洗脱，经色谱检测，收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到预分离物；将预分离物用乙腈水溶液溶解，进行液相半制备，收集含有目标化合物的流分段，浓缩冻干得到目标化合物。本申请提供的方法，从朝鲜蓟中有效分离出目标化合物，提取纯度高，提取方法简单，有利于朝鲜蓟的深度开发。

技术领域

本发明涉及提取纯化领域，具体而言，涉及一种制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法。

背景技术

朝鲜蓟为菊科菜蓟属多年生草本植物，又名菜蓟、洋蓟、菊蓟、荷花百合、法国百合，学名Cynara scolymus L.。原产于地中海沿岸，欧洲南部及北非，19世纪由法国传入中国上海，现主要分布在上海、浙江、云南、湖南、山东及北京等地。朝鲜蓟食用价值极高，有“蔬菜之皇”的美誉。

朝鲜蓟叶提取物长期以来一直用于民间医药，其体外和临床试验表明，朝鲜蓟提取物具有抗氧化、抑菌、抗癌抗肿瘤、保肝、降血糖、改善消化及改善高胆固醇血症等功效，愈创木烷半倍萜内酯作为其主要功效成分有望被开发为治疗炎症性疾病(如风湿性关节炎)、特异性抗乙型肝炎病毒、II型糖尿病相关的新型PTP-1B抑制剂、血管生成抑制剂和治疗多种癌症的新药物以及促进胃动力和治疗胃溃疡的新药物。

但是现有技术对于其有效成分的分离纯化研究有限。如何从朝鲜蓟中提取出愈创木烷型倍半萜化合物等生物活性成分，对深度开发朝鲜蓟作物极其重要。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法，从朝鲜蓟中提取出目标化合物，而且快速有效、纯度高。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种制备愈创木烷型倍半萜化合物的方法，所述方法包括以下步骤:

A.将朝鲜蓟粉碎后用乙醇水溶液浸提后得到粗提液；

B.所述粗提液上样至AB-8型大孔树脂层析柱，依次用水、体积分数为20％、50％、80％的乙醇水溶液进行洗脱，经色谱检测，收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到粗提物；

C.所述粗提物用体积分数为50％的甲醇水溶液溶解后上样至RP-C18层析柱，依次用体积分数为30％、48％和100％的甲醇水溶液进行洗脱，经色谱检测，收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到预分离物；

D.将所述预分离物用体积分数为18％的乙腈水溶液溶解，使用Venusil MP C18色谱柱、以流动相A为乙腈、流动相B为甲酸水溶液作为流动相进行液相半制备，收集含有目标化合物的流分段，浓缩冻干得到目标化合物，所述目标化合物的结构式为：

使用浸提－AB-8型大孔树脂柱层析－RP-C18柱层析－乙腈/甲酸水溶液液相半制备的方法，有效的将目标化合物从朝鲜蓟中分离出来。经过优化的、特定的提取步骤以及各个步骤的相关参数，是快速高效获得目标化合物的保障。

优选地，所述AB-8型大孔树脂层析柱的制作方法为：先将AB-8型大孔树脂颗粒用无水乙醇浸泡20-24h进行预处理，然后装柱，用水冲洗至无醇味。

预处理是为了有效的保障大孔树脂柱层析的分离效果，避免杂质的干扰。

优选地，所述RP-C18层析柱的制备方法为：将RP-C18颗粒放入甲醇中进行超声处理，并不断搅拌，去除气泡；然后将处理好的所述RP-C18颗粒和甲醇一同装柱。

更加优选地，所述RP-C18颗粒的规格为：40-60μm，