[发明专利]作为T细胞衔接器的双特异性IgG抗体

说明书

本发明涉及作为T细胞衔接器的双特异性IgG抗体。本发明提供了人IgG双特异性抗体，其中所述抗体的一条臂与免疫效应细胞上的表位相结合，而另一条臂靶向CLEC12A或其功能等同物。还提供了针对恶性疾病例如MDS、CML或AML的这些抗体的制药用途。

本申请是申请号为201380061615.9的中国专利申请的分案申请，原申请是2013年9月27日提交的PCT国际申请PCT/NL2013/050693于2015年5月26日进入中国国家阶段的申请。

技术领域

本发明涉及抗体工程领域。特别地，其涉及用于治疗与异常细胞有关之疾病的治疗性(人)抗体的领域。更特别地，其涉及用于治疗肿瘤的双特异性抗体。

背景技术

在实验室中，双特异性抗体已被广泛地用于将免疫效应细胞重新靶向至肿瘤细胞。在这种情况下，一个结合位点针对肿瘤相关抗原(TAA)，而第二抗原针对效应细胞上的触发分子，例如T细胞上的CD3(Kontermann，MABS 2012(4)182-197；Chames和Baty，MABS2009(1)539-547；Moore等，Blood 2011(117)4542-4551)。靶向CD3和肿瘤细胞相关抗原的第一个双特异性抗体具有啮齿类动物性质并且使用杂交的杂交瘤来产生(Liu等1985，PNAS82：8648，Staerz等1986，PNAS83：1453，Lanzavecchia等1987，Eur.J.Imm 17：105)。在这些杂交的杂交瘤中，Ig重链和轻链的重配导致在单特异性和因重链和轻链错配造成的非功能双特异性抗体之大得多的库内产生双特异性功能抗体分子。因为它们的双特异性，这些功能双特异性抗体能够将鼠和人的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)桥接(bridge)到靶细胞并触发细胞毒性作用，从而导致展示出相关抗原的肿瘤细胞裂解。然而，无法实现CD3×TAA双特异性IgG介导的多克隆静息人T细胞对肿瘤细胞裂解的诱导，除非通过添加外源IL-2或抗CD28mAb提供共刺激。这通过杂交大鼠IgG2b/小鼠IgG1 CD3×CD19双特异性分子得以例证，所述分子仅在共施用IL-2后才能诱导静息人T淋巴细胞对CD19阳性REH B-ALL肿瘤细胞系的裂解(Haagen等，1995Blood 85：3208)。Zeidler等使用类似的大鼠IgG2b/小鼠IgG2a CD3×Epcam分子证明，可在包含外周血单核细胞(PBMC)和肿瘤细胞两者而不添加外源IL2的混合的细胞培养物中实现双特异性IgG诱导的Epcam阳性肿瘤细胞的裂解(Zeidler等1999J.Immunol.163：1246)。作者声称该抗体的“第三”臂(Fc区)，通过与在PBMC级分中存在的Fcγ受体阳性辅助细胞(accessory cell)相互作用而引起这种效果。特别地，强活化潜力与杂交亚类组合小鼠IgG2a/大鼠IgG2b有关，与其他报道的组合(例如小鼠IgG2a/小鼠IgG1或大鼠IgG2b/小鼠IgG1)相比，所述组合不仅与Fcγ受体阳性辅助细胞结合而且将其活化。这种所谓的triomAb CD3×Epcam双特异性抗体(也称为卡妥索单抗(catumaxomab))，已经在临床上开发并且在欧洲注册用于上皮源性腹部肿瘤的姑息治疗。虽然已经清楚地证明了这种双特异性抗体的临床功效，但是其啮齿类动物性质在重复给药后诱导抗产品免疫应答，因此阻止了这种形式的广泛应用。