[发明专利]一种组织工程肌腱微组织的制备方法在审
| 申请号： | 201811470046.4 | 申请日： | 2018-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN109675113A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 彭江;亓建洪;张凯红;孟昊业;汪爱媛;汤贺;王玉;许文静;孙百川;刘雪剑;柳昊;袁光华;卢世璧;郭全义;刘舒云 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院;泰山医学院 |
| 主分类号： | A61L27/38 | 分类号： | A61L27/38;A61L27/36;A61L27/50 |
| 代理公司： | 北京君尚知识产权代理事务所(普通合伙) 11200 | 代理人： | 余长江 |
| 地址： | 100039*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肌腱 肌腱细胞 微组织 基质 制备 组织工程 脱细胞 成型 生物医药技术 生物源性材料 真空冷冻干燥 干细胞构建 大鼠脂肪 低温定型 反复冻融 肌腱损伤 生物材料 大鼠尾 干细胞 高品质 构建 胶原 体外 摇床 诱导 蛋白 取出 分化 修复 | ||
1.一种组织工程肌腱微组织的制备方法，步骤包括：
将大鼠尾腱取出，反复冻融若干次，在摇床上经过SDS溶液于室温下处理，制备成脱细胞的肌腱细胞外基质；
将上述脱细胞的肌腱细胞外基质低温定型，经真空冷冻干燥，获得成型的肌腱细胞外基质；
将上述成型的肌腱细胞外基质与P2代大鼠脂肪干细胞共培养若干天，制备出组织工程肌腱微组织。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大鼠尾腱取出的方法为：取若干只健康的150-200g重的SD大鼠鼠尾，按关节段分离成小段，再在无菌条件下取出大鼠尾腱，经PBS溶液彻底清洗后置于含1％～5％双氧水的容器中，0～25℃下过夜。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，充分洗净所述大鼠尾腱上的多余双氧水，加入PBS溶液淹没尾腱，并将其反复冻融3～5次。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述SDS溶液浓度为1％～3％，处理时间为12～48h。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对所述脱细胞的肌腱细胞外基质采用病理染色、抗原检测的方法评价其脱细胞的效果。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述脱细胞的肌腱细胞外基质先后置于-10～-40℃冰箱、-60～-110℃冰箱中以低温定型。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述成型的肌腱细胞外基质用密封袋贮存密封，再用钴60消毒，4℃下保存备用。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养天数为7～14天。
9.一种利用上述权利要求1～8任一所述的方法制备的组织工程肌腱微组织。
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