[发明专利]一种肌酸激酶同工酶MB的定量检测方法

说明书

本发明涉及生物科技技术领域，具体的说是一种肌酸激酶同工酶MB的定量检测方法，包括肌酸激酶同工酶MB溶液配制、微流肌酸激酶同工酶MB检测芯片及其使用方法、微流控芯片是以微管道网络为结构特征，各工作单元既能独立完成单一反应或单元操作，也能与其他单元合作完成较复杂的工作，使整个芯片称为一个动态的反应体系。其主要特点是高通量、微型化和自动化，是在传统生物技术和疾病诊断等方面的创新和飞跃；免疫微球化学发光与微流控芯片的结合使得全自动化仪器更加小型化和简单化，减少了后期的管道维护和机械臂维护；而且这两者的结合又将原本POCT应用的固相反应转换成了液相的均相反应，更兼具了传统管式化学发光的高反应效率，高灵敏度及检测区间。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体的说是一种肌酸激酶同工酶MB的定量检测方法。

背景技术

肌酸激酶是细胞内能量转运、ATP代谢起着至关重要的激酶。肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)是肌酸激酶(CK)的一种同工酶，是CK在翻译后修饰过而生成的，主要存在于心肌细胞中(还有少量存在于骨骼肌、肠道、舌头、前列腺以及子宫中)，是心肌能量代谢途径中非常重要的肌酸激酶。CK-MB有两个亚基组成，分贝是M亚基和B亚基，M代表肌肉而B代表大脑，其活性蘸总肌酸激酶活性的15％～30％。除CK-MB外还存在另外两种肌酸激酶同工酶，分别是存在于大脑中的CK-BB和存在于骨骼肌中的CK-MM，三种同工酶活性相似但是等电点不同。尽管大体上肌酸激酶同工酶可分为上述三种，但是当B亚基和M亚基经过翻译后修饰作用后还可以产生多种亚型，其中包括三种CK-MM亚型(CK-MM1、CK-MM2、CK-MM3)和至少三种CK-MB亚型(人类体内已经发现了两种CK-MB1和一种CK-MB2)，在非受损的组织中CK-MM的95％的存在亚型为CK-MM3。当组织受损后CK-MM3释放入血液中，在羧肽酶作用下会形成CK-MM1、CK-MM2；同CK-MM，心肌细胞内CK-MB的主要亚型是CK-MB2，心肌受损后其释放入血液，在羧肽酶作用下会变成CK-MB1，此外还有巨型肌酸激酶。1960年CK首先被研究并认为可以用来诊断ACS，但是由于其特异性较差，于1970年后被CKMB取代，随之CKMB由于其具有较好的特异性和灵敏度被推荐为上一代的AMI诊断金标准。然而由于骨骼肌中也存在少量CKMB，并且在儿童中骨骼肌中的CKMB会更高，因此由于特异性不好又造成误诊的风险，目前已经被新的AMI金标准标志物cTnI所取代。尽管如此，CKMB在ACS和AMI诊断中仍然具有重要的临床意义。首先，当心肌损伤已发的胸痛发作后，CKMB出现在血液中的时间比cTnI早，因此CKMB可以作为AMI早期诊断的标志物。其次，CKMB是溶栓治疗效果评估的首选标志物，当阻塞的心肌冠状动脉再通时，心肌细胞中的CKMB会被血流冲刷出来，造成CKMB的会被血流冲刷出来，造成CKMB的升高，利用这个特点可以根据CKMB浓度的变化情况评估溶栓治疗效果。再次，CKMB检测可以用来评估心肌梗死范围和再梗死。最后，当cTnI不可用或者cTnI的结果难以确诊时，CKMB是cTnI有效的辅助标志物。