[发明专利]链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白及其应用有效
| 申请号： | 201811473694.5 | 申请日： | 2018-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN111269322B | 公开（公告）日： | 2022-02-18 |
| 发明（设计）人： | 李静;王佑富;郑越;董宇亮;章文蔚;徐崇钧 | 申请（专利权）人： | 深圳华大智造极创科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/82 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 孙银行;彭家恩 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市盐田区盐*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亲和 荧光 融合 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种链霉亲和素和高斯荧光素酶的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括链霉亲和素全长蛋白和高斯荧光素酶持续发光突变体，所述持续发光突变体序列如SEQ ID NO：3所示，所述链霉亲和素全长蛋白与所述高斯荧光素酶持续发光突变体通过柔性肽连接。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述链霉亲和素全长蛋白序列如SEQID NO：1所示。
3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述柔性肽序列如SEQ ID NO：4所示。
4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括：信号肽，该信号肽用于引导所述融合蛋白从表达细胞内向外分泌。
5.根据权利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述信号肽位于所述融合蛋白的N端。
6.根据权利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述信号肽序列如SEQ ID NO：5所示。
7.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括：融合标签，该融合标签用于亲和纯化所述融合蛋白。
8.根据权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合标签是6×组氨酸标签。
9.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白序列如SEQ ID NO：7所示。
10.一种分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸编码权利要求1所述的融合蛋白。
11.根据权利要求10所述的分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸包括链霉亲和素全长蛋白编码序列和高斯荧光素酶持续发光突变体编码序列，所述链霉亲和素全长蛋白编码序列与所述高斯荧光素酶持续发光突变体编码序列通过连接序列连接，所述高斯荧光素酶持续发光突变体编码序列如SEQ ID NO：10所示。
12.根据权利要求11所述的分离的核酸，其特征在于，所述链霉亲和素全长蛋白编码序列如SEQ ID NO：8所示。
13.根据权利要求11所述的分离的核酸，其特征在于，所述连接序列如SEQ ID NO：11所示。
14.根据权利要求11所述的分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸还包括：信号肽编码序列，该信号肽编码序列编码信号肽，该信号肽用于引导所述融合蛋白从表达细胞内向外分泌。
15.根据权利要求14所述的分离的核酸，其特征在于，所述信号肽编码序列位于所述分离的核酸的5’端。
16.根据权利要求14所述的分离的核酸，其特征在于，所述信号肽编码序列如SEQ IDNO：12所示。
17.根据权利要求11所述的分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸还包括：融合标签编码序列，该融合标签编码序列编码融合标签，该融合标签用于亲和纯化所述融合蛋白。
18.根据权利要求17所述的分离的核酸，其特征在于，所述融合标签编码序列是编码6×组氨酸标签的序列。
19.根据权利要求10所述的分离的核酸，所述分离的核酸序列如SEQ ID NO：14所示。
20.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括编码权利要求1-9任一项所述的融合蛋白的核酸序列，以及载体骨架序列。
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