[发明专利]HPLC测定马缨丹药材中山栀苷甲酯的方法

说明书

本发明公开了一种测定马缨丹药材中山栀苷甲酯的方法。方法包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)HPLC检测。本发明方法的操作简便、准确度高、专属性好、精密度较高、重现性良好，有利于保证马缨丹药材的质量可控性和临床应用疗效稳定性。

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，特别涉及测定马缨丹药材中山栀苷甲酯成分的方法。

背景技术

马缨丹具有清热解毒，祛风利湿，活血止痛等功效，可用于治疗感冒，痄腮，风湿痹痛，铁打损伤等症状。其药效是多种活性成分共同作用的结果，目前马缨丹的检测方法主要为显微和薄层色谱法鉴别。马缨丹的主要成分有三萜类、环烯醚萜类、黄酮类、苯丙素类等化学成分，以山栀苷甲酯为代表的环烯醚萜类化合物具有镇痛、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多方面的药理活性作用。《Acta Chromatographica》2003年1 月收载的S.C.VERMA《RapidExtraction,Isolation,and Quantification of Oleanolic Acid from Lantana camaraL.Roots Using Microwave and HPLC–PDA Techniques》中，只检测了齐墩果酸的含量。目前，以马缨丹入药的中成药仅有1种即复方马缨丹片，而当马缨丹应用于复方制剂中时，齐墩果酸专属性不强，无法在质量控制中作为指标性成分。

发明内容

本发明的目的就是针对马缨丹药材的检测现状，为有效地控制马缨丹药材以及有关复方制剂的内在质量，提供一种测定马缨丹药材中山栀苷甲酯的方法，有利于对马缨丹药材质量的有效控制及保证其临床疗效。

一种测定马缨丹药材中山栀苷甲酯的方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

称取山栀苷甲酯对照品，置于容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

马缨丹药材供试品溶液的制备：取马缨丹药材，置锥形瓶中，加甲醇，称重，超声处理30min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，取续滤液，用微孔滤膜滤过，即得马缨丹药材供试品溶液；(3)HPLC 检测：

分别吸取步骤(1)和(2)所得的山栀苷甲酯对照品溶液和马缨丹药材供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；

其中，色谱条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；紫外检测器；柱温为35℃；检测波长为235～240nm；流动相A为超纯水，流动相B为乙腈，流速为0.9～1.0ml/min；分析时间45分钟；梯度洗脱程序为：

所述步骤(1)对照品溶液的制备优选为下述方法进行：

分别称取山栀苷甲酯对照品12.20mg置于25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液。

所述步骤(2)供试品溶液的制备优选为下述方法进行：

取马缨丹药材，粉碎，过3号筛，称取0.5g粉末，置锥形瓶中，加70％甲醇水溶液20mL，密塞，称重，超声处理30min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得马缨丹药材供试品溶液；

所述步骤(3)中的色谱柱优选柱长为250mm的C₁₈反相色谱柱。

所述步骤(3)中流速优选为0.9ml/min。

所述步骤(1)和(2)中甲醇浓度优选为70％。

为更好的表明本发明的实质，将本发明的方法学考察详述如下：

1.1药品与试剂