[发明专利]一种柳珊瑚酸的微生物制备方法

说明书

本发明涉及一种柳珊瑚酸的微生物制备方法，属于微生物技术领域。本发明所用生物菌(Aspergillus sp.)的保藏号为GDMCC No.60476，通过本发明生物菌制备柳珊瑚酸的方法首次提供了柳珊瑚酸的微生物制备方法，首次证实柳珊瑚酸的真正来源是由共附生微生物所产生，真正解决其来源问题；首次从培养基入手，对其生长环境进行调控，观察富营养、生物转化对目标产物柳珊瑚酸产生的影响；首次从软珊瑚共附生真菌中分离得到柳珊瑚酸，证明了宿主所产生的次生代谢产物往往是其共附生、内生或其环境微生物产生的假说。

技术领域

本发明涉及一种柳珊瑚酸的微生物制备方法，属于微生物技术领域。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’disease，AD)是一种神经退行性疾病，以进行性的记忆、认知损害及个性改变为主要特征。AD是老年痴呆症最常见的原因，占比60％～80％。目前我国AD患者已经达600万，随着我国人口老龄化的加剧，发病率将呈逐渐上升趋。据估计，目前世界上有5000万老年痴呆症患者，预计2030年将达到0.82亿，而2050年将达到1.52亿。从2000年到2013年，卒中、心脏病和前列腺肿瘤导致的死亡分别下降了23％、14％和11％，而AD导致的死亡增加了71％。同时，患者丧失个人生活和行为能力，给社会和家庭带来了巨大的负担。近年来认为老年性痴呆是由于大脑皮层Ach-E缺损而引起的。痴呆的严重程度与记忆的缺损和皮层的胆碱能传到有关。毒扁豆碱能改善老年性痴呆患者的记忆，但其缺点是治疗指数低，口服生物利用度极低，且化学性质不稳定。他克林(tacrine)1993年已获得美国FDA批准，但它也具有一定的肝毒性。因此，寻找新的可逆性胆碱酯酶抑制剂和乙酰胆碱促效剂来治疗老年性痴呆，是当今新药研究中很活跃的领域。

柳珊瑚酸为无色柱状晶体，m.p.178～180℃，分子式：C₁₅H₂₀O₃，结构特征：三环倍半萜、且均为五元环，环张力大，A/B、B/C环均顺式骈并。柳珊瑚酸是目前为止首个具有三环十一烷(cyclopentapentalane)骨架的化合物，1979年从海洋侧扁软柳珊瑚Suberogoriaappressa中得到。1985年，中科院生物物理研究所和美国加州大学William Fenical教授通过XRD确定其结构，同时进行了系列类似物的合成研究。天然的柳珊瑚酸(1)及其类似物(2～8)的结构式如下所示：

文献药理活性研究表明柳珊瑚酸及其合成类似物具有强烈的神经毒性，当其高剂量为20mg/kg(LD₅₀)时，具有强烈的心肌毒性；但在3mg/kg(LD₅₀)时其又表现为抗神经毒活性，其已作为心肌毒解毒剂引起国防部门的极大关注。动物实验还表明柳珊瑚酸还具有抗心律失常，对心肌缺血在灌注损伤有明显的保护，并具有抗利尿的作用；同时表明柳珊瑚酸的药理作用与受体及离子流无关，而与酶系统有关。在研究柳珊瑚酸对离体心房肌和离体回肠的生理特性时，均发现柳珊瑚酸的作用于离子流无直接关系，而与Ach-E有关。但在柳珊瑚酸对记忆研究中发现其对记忆有改善作用，且其作用于抗乙酰胆碱酯酶(Ach-E)有关。柳珊瑚酸(suberogorgin)高剂量时表现为神经毒性，低剂量时表现为抗神经毒性，即其在高剂量时表现为拟胆碱作用，而在低剂量表现为Ach-E保护作用，属于药理学理论中的“可逆性胆碱酯酶抑制剂”。因此，柳珊瑚酸及其衍生物有望成为新的老年性痴呆症治疗药物，且该研究已经进入临床前试验阶段。