[发明专利]一种防霉芽孢杆菌菌株及其在粮食储藏中的应用

说明书

本发明公开了一种抗霉菌的芽孢杆菌属菌株及其筛选和应用。该菌株分类命名为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BYJ7，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCC 16705。本发明还提供了一种制备该芽孢杆菌培养液及其挥发性代谢物的方法。本发明所述地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)及其挥发性代谢物对储粮(尤其是大米)中主要腐败菌的生长能够起到良好抑制作用，适用范围广、应用前景好、开发潜力强；且具高效节能、环境友好等特点，可应用于粮食防霉剂的制备。

技术领域

本发明属于新菌种筛选技术及微生物技术领域，特别涉及一株抗霉菌的芽孢杆菌属菌株及其在粮食储藏中的防霉应用。

背景技术

大米是我国南方地区主要粮食作物之一，然而由于受农户个体种植、贮藏方式，以及长江流域和华南地区高温高湿天气等诸多因素的影响，大米在仓储、运输和销售环节中受真菌毒素污染情况严重，极易发生霉变。

国内外在大米保鲜方法上主要从以下几个方面进行了研究：一是研究大米陈化的机理，来控制陈化提高大米的存放期，延缓大米在储藏过程中水分、蛋白质、淀粉和脂肪等的变化；二是通过杀死大米上附着的成虫、虫卵、细菌或破坏其生长环境，从而抑制生物生长繁殖，来延长大米的储藏期；三是将大米与虫卵、细菌隔离，使之失去营养来源来提高大米的储藏品质(吴艳丽,潘丽爱.大米保鲜及储藏技术的研究进展.粮食工程·技术,2013,10:59-62)。其中，对于杀灭或抑制大米上致病菌这一方面，目前市面上主要采取的措施是采用保鲜剂或化学熏蒸。尽管运用化学防腐剂是为目前最为经济有效的办法，但由于剂量超标、使用频繁等原因，其对土壤、水体等环境污染也日益严重。残留在粮食中的化学杀菌剂通过食物链可进一步影响到人体健康，带来一定食品安全问题。基于上述原因，寻找和开发能够代替化学防腐剂且安全无污染的大米保鲜方法是为当前农业发展的一个必然。

目前生物防霉剂已部分代替化学防腐剂被应用在肉类、果蔬等食品保鲜及加工中。但总体而言，目前对于大米等粮食的储藏保鲜方法主要是通过气调等环境控制或用化学熏蒸剂处理来控制微生物生长。芽孢杆菌是一种自然界中广泛存在的革兰氏阳性杆状细菌，其特征在于能够产生多种抑菌物质和酶类，具有较强的防腐作用，且分离培养容易，应用前景广。但目前，还未有将芽孢杆菌挥发性代谢产物应用到粮食防霉保鲜领域的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株抗霉菌芽孢杆菌属菌株及其应用方法，其挥发性代谢物可在粮食储藏过程中通过气调发挥防霉作用，是一种简单易行、高效环保的微生物处理方法，具有广阔的市场前景。

本发明公开了一种抗霉菌芽孢杆菌属菌株，所述菌株的分类命名为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BYJ7，保藏单位：中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号：CGMCC No.16705，保藏日期：2018年11月5日。

本发明还公开了一种抗霉菌芽孢杆菌属菌株的筛选方法，具体方法为：选用多区域分隔培养皿，隔板一侧加入马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA，用于培养黄曲霉菌；另一侧加入TSA或LB培养基以培养芽孢杆菌。实验组挑取已经活化的芽孢杆菌涂布至培养皿上，涂布区域保持一致；空白对照组则不进行上述涂布操作，之后用竹签挑取少量黄曲霉菌孢子以点涂方式接种至培养皿PDA培养基一侧区域的中心位置；接种完成、封口膜双层封口后，于25℃培养箱中倒置培养一周，且每隔24h测量各组黄曲霉菌菌斑直径，并计算抑菌率；选取抑菌率大于15％的菌株，以抑菌率为指标筛选出所述最佳抗霉菌芽孢杆菌属菌株。本发明的筛选方法具有普适性，能够推广到所有粮食防霉细菌的筛选,筛选得到的菌的发酵液可释放气体挥发物，该气体挥发物对霉菌抑制效果佳。本发明所述的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BYJ7是该方法筛选得到的其中一种所产气体挥发物抑制功效最好的菌株。