[发明专利]一种脂蛋白(a)的制备方法

权利要求书

1.一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一 沉淀脂蛋白(a)

向血清中加入大分子化合物和金属离子，所述大分子化合物的浓度为0.1～10％，然后混匀，混匀后离心，然后取一次沉淀；

步骤二 沉淀的溶解

向所述一次沉淀中加入缓冲液，所述缓冲液的浓度为0.01～0.1mol/L；再加入所述金属离子进行搅拌溶解，溶解后进行离心，然后取上清液；

步骤三 化合物及金属离子的去除

向所述上清液中加入非选择性沉淀剂，进行沉淀反应，所述非选择性沉淀剂的浓度为1.0～5.0％，所述非选择性沉淀剂的加入量为所述上清液体积的8～12％；反应完全后进行离心，然后取二次沉淀；

向所述二次沉淀中加入所述缓冲液，然后加入所述金属离子，溶解沉淀，得到脂蛋白(a)；

步骤四 纯化脂蛋白(a)

采用国家标准检测方法对所述脂蛋白(a)进行纯化，并计算纯化产出量。

2.根据权利要求1所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述金属离子的浓度为0.01～0.1mol/L。

3.根据权利要求2所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述金属离子为NaCl、KI、KCL、NaI、KBr、MgCl₂、CaCl₂、MnCl₂中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述金属离子为MgCl₂、CaCl₂、MnCl₂中的任意一种。

5.根据权利要求1所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述大分子化合物与所述血清的体积比为1～10:100。

6.根据权利要求5所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述大分子化合物为肝素、PVP、DS中的任意一种或者几种。

7.根据权利要求6所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述大分子化合物为肝素和DS，且肝素和DS的体积比为1:4～7。

8.根据权利要求1所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述缓冲液的pH为5.0～9.0。

9.根据权利要求8所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述缓冲液与所述一次沉淀的体积比为0.8～1.3：10；所述缓冲液与所述二次沉淀的体积比为0.8～1.3：10。

10.根据权利要求1所述的一种脂蛋白(a)的制备方法，其特征在于，所述非选择性沉淀剂为硫酸铵、硫酸钠或聚乙二醇中的任意一种。