[发明专利]嵌合蛋白、表达嵌合蛋白的免疫效应细胞及其应用

说明书

本发明涉及一种表达嵌合蛋白的免疫效应细胞及其应用，具体提供了表达含有TGF‑β受体的胞外域和IL‑2家族蛋白的受体的胞内信号域的嵌合蛋白的免疫效应细胞、包含所述免疫效应细胞的药物组合物以及上述免疫效应细胞或药物组合物在制备预防或治疗肿瘤或病原微生物感染的药物中的用途。本发明的表达嵌合蛋白的免疫效应细胞能够将TGF‑β的刺激转变为IL‑2、IL‑7或IL‑21的积极信号、抑制TGF‑β诱导的Treg分化，从而促进免疫细胞的增殖和存活；并且还能够降低TGF‑β对细胞杀伤能力的影响，展现出了较好的抗肿瘤能力。

技术领域

本发明属于过继性细胞治疗领域；具体地说，本发明涉及一种嵌合蛋白及基因工程化的免疫效应细胞，该免疫细胞可以显著增强免疫细胞增殖和存活能力，且能够增强其细胞杀伤能力。

背景技术

近年来，过继性细胞治疗如CAR-T治疗、TCR-T治疗等在血液瘤领域展现了良好的效果，然而对于实体瘤的治疗却乏善可陈，这是因为实体瘤中的癌细胞能够在其周围形成肿瘤微环境以支持癌细胞的生长和转移。肿瘤微环境中大量表达的免疫抑制性细胞因子如IL-4、IL-10、TGF-β等，抑制了CAR-T细胞的抗肿瘤活性。并且，TGF-β的存在，还会诱导T细胞分化为调节性T细胞(Treg)，调节性T细胞会进一步抑制T细胞杀伤作用。

有研究人员尝试采用抑制TGF-β的信号，以阻断了TGF-β对T细胞的抑制。如Foster等人(“Antitumor Activity of EBV-specific T Lymphocytes Transduced With aDominant Negative TGF-βReceptor”,J Immunother,2008)报道了转染表达dominantnegative的TGF-β受体，以阻断TGF-β信号的转导，但该方法仅仅是阻断了TGF-β对T细胞的抑制。Wang等人(“Augmented anti-tumor activity of NK-92cells expressingchimeric receptors of TGF-βR II and NKG2D”，Cancer Immunol Immunother，2017)报道了TGF-β受体II胞外区与NKG2D胞内区的嵌合，该嵌合受体可增强NK-92细胞分泌IFNγ和对靶细胞的杀伤，但其疗效增强不显著。

现有技术中缺乏能够有效促进免疫细胞增殖和存活的免疫效应细胞，是本领域长期以来一直研究的课题。

发明内容

本发明的目的在于显著增强免疫细胞增殖和存活能力，且能够增强其细胞杀伤能力，本发明的目的通过一种特定的嵌合蛋白及基因工程化的免疫效应细胞得以实现。

在第一方面，本发明提供一种表达嵌合蛋白的免疫效应细胞，所述嵌合蛋白含有TGF-β受体的胞外域以及IL-2家族蛋白的受体的胞内信号域。

在具体的实施方式中，所述的免疫效应细胞还表达能够识别靶抗原的嵌合受体；优选地，所述嵌合受体为嵌合抗原受体(CAR)、T细胞受体(TCR)、T细胞融合蛋白(TFP)、或T细胞抗原耦合器(TAC)；更优选地，所述嵌合受体为嵌合抗原受体(CAR)。

在具体的实施方式中，所述的TGF-β受体的胞外域包含TGF-β受体I的胞外域和/或TGF-β受体II的胞外域；优选TGF-β受体II的胞外域。

在具体的实施方式中，所述的IL-2家族蛋白的受体胞内信号域选自IL-2受体、IL-4受体、IL-7受体、IL-9受体、IL-15受体、IL-21受体中任一受体的胞内信号域或至少两种的组合；

优选地，选自IL-2受体、IL-7受体、和IL-21受体中任一受体的胞内信号域；

更优选地，所述的IL-2家族蛋白的受体胞内信号域为IL-7受体的胞内信号域或IL-21受体的胞内信号域。

在具体的实施方式中，所述的IL-2家族蛋白的受体胞内信号域包含IL-2RG的胞内域。