[发明专利]一种呼吸道病毒核酸的检测方法和便携式病毒核酸检测仪在审

专利信息
申请号: 201811488492.8 申请日: 2018-12-06
公开(公告)号: CN109536640A 公开(公告)日: 2019-03-29
发明(设计)人: 王升启;荣振;肖瑞 申请(专利权)人: 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6837;C12M1/34;C12R1/93
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 郭新娟
地址: 100000 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 反应孔 生物芯片 核酸 病毒核酸检测 生物芯片检测 图像采集处理 呼吸道病毒 核酸杂交 标记液 检测 聚合酶链式反应 病毒 图像 设备采集 输出检测 杂交探针 滴入
【说明书】:

发明提供了一种呼吸道病毒核酸的检测方法和便携式病毒核酸检测仪。方法包括:对提取的核酸进行聚合酶链式反应PCR扩增,得到PCR产物;将经过PCR扩增后得到的所述PCR产物加入到生物芯片上的反应孔,所述反应孔内设置有杂交探针,进行核酸杂交;将标记液滴入所述反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与标记液进行反应;将生物芯片设置于便携式生物芯片检测样品台上,由安装于所述生物芯片检测样品台上的图像采集处理设备采集包含生物芯片的反应孔的图像;图像采集处理设备对所述图像进行处理,检测是否包含有病毒以及所包含有的病毒的数量,输出检测结果。具有简单、高效的积极效果。

技术领域

本发明涉及病毒检测技术领域,具体而言,涉及一种呼吸道病毒的检测方法和便携式病毒核酸检测仪。

背景技术

呼吸道病毒所引起的疾病是在各个年龄段的人群中十分常见的疾病,对于呼吸道病毒的诊断,一般是通过检测血液中的白细胞指标进行判断或者通过表象观察进行判断,由于对病毒的检测的过程繁琐,进而很少进行病毒数量的检测。然而为进一步更精细的指导呼吸道病毒所引起的疾病的治疗,进行呼吸道病毒检测时,不仅需要对病毒进行定性的检测还需要进行定量的检测。因此如何提供一种准确和高效的针对于呼吸道病毒的病毒检测方法具有十分重要的意义。

发明内容

有鉴于此,本发明的目的在于提供一种呼吸道病毒核酸的检测方法和便携式病毒核酸检测仪,以提高对呼吸道病毒的检测效率。

第一方面,本发明实施例提供了一种呼吸道病毒核酸的检测方法,包括:

从血液样本或咽拭子样本中提取核酸;

对所述核酸进行PCR扩增,得到PCR产物;其中,进行PCR扩增所使用的引物为生物素化的引物;

将经过PCR扩增后得到的所述PCR产物加入到生物芯片上的反应孔,所述反应孔内设置有杂交探针点样,不同的所述杂交探针点样在所述反应孔中的位置是预先设定的,进行核酸杂交;

将标记液滴入所述反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与标记液进行反应;

将所述生物芯片设置于便携式生物芯片检测样品台上,由安装于所述病毒检测样品台上的图像采集处理设备采集包含生物芯片的反应孔的图像;如果被检测病毒为阳性,则该图像中包含有表征病毒的量子点荧光图像;

所述图像采集处理设备对所述图像进行处理,检测是否包含有病毒以及所包含有的病毒的种类和数量,输出检测结果。

结合第一方面,本发明实施例提供了第一方面的第一种可能的实施方式,其中,所述对所述核酸进行扩增的条件为:在温度为94℃的条件下,变性10s;在温度为55℃条件下,退火20s;在温度为72℃的条件下,延伸20s;并且,按照该扩增条件执行变性、退火和延伸的整个过程的循环次数为35-45次。

结合第一方面,本发明实施例提供了第一方面的第二种可能的实施方式,其中,所述按照该扩增条件执行变性、退火和延伸的整个过程的循环次数为40次。

结合第一方面,本发明实施例提供了第一方面的第三种可能的实施方式,其中,所述将标记液滴入所述反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与标记液进行反应,包括:

取容积为10uL,浓度为2.5nM-30nM的用于亲和素标记的红色量子点复合物QDs–SA标记液,滴加于所述生物芯片反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与所述标记液进行反应。

结合第一方面的第三种可能的实施方式,本发明实施例提供了第一方面的第四种可能的实施方式,其中,所述将标记液滴入所述反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与标记液进行反应,包括:

取容积为10uL,浓度为25nM的用于亲和素标记的红色量子点标记的链霉亲和素复合物QDs–SA标记液,滴加于所述生物芯片反应孔,使核酸杂交后的PCR产物与标记液进行反应。

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