[发明专利]从防已中提取防已甲素和防已乙素的方法

说明书

本发明提供一种从防已中提取防已甲素和防已乙素的方法，其具体步骤如下：干防已根粉碎，加入枯草芽孢杆菌和酵母菌发酵，醇提，过滤，浓缩得浓缩液，盐酸pH值，丁醇萃取得水相A和丁醇萃取液A；向丁醇萃取液A用氢氧化钠和盐酸pH值，丁醇萃取，浓缩，碳酸钠溶液溶解，过滤，乙醇结晶得防已甲素；取水相A，氢氧化钠至pH值，丁醇萃取，浓缩，碳酸钠溶液溶解，过滤，乙醇结晶得防已乙素。本发明能有效提高防已生物碱的收率，降低废水处理的难度，提高防已资源的利用率。

技术领域

本发明属于天然产物提取领域，涉及一种从防已中提取防已甲素和防已乙素的方法。

背景技术

防已为马兜铃科植物，以根入药，根呈圆柱形，多少弯曲，弯曲处有深陷横沟，长6～15cm，直径1.5～3cm。外皮浅棕色或淡棕黄色，刮去外皮为浅灰黄色。质坚实，不易断，断面不平坦，刺状，横切面灰白色至黄白色，粉性，皮部较厚，木部束灰黄色，呈放射状排列。味苦，微涩。以块大、皮厚、富粉性者为佳。主产陕西汉中地区。此外，湖北、湖南、四川、云南等地。四季均可采收，但以科季采挖者为好。挖取根后去净泥沙及须根，刮去或不刮去栓皮，晒至半干，直径在2.5cm以上对半劈开，晒干即可。根中主要成份为含马兜铃酸，β-谷甾醇，木兰花碱，尿囊素等。功用主治：祛风利水，除湿镇痛。用于头面四肢水肿，腰膝关节疼痛等。

目前对防已有效成分研究较多，如徐应淑等采用TLC法分离汉防己中汉防己甲素、乙素，能得到较高得率的防己甲素和乙素，但是TLC法无法进行工业化生产。黄浔阳、甄攀等采用从粉防己植物茎、叶中提取汉防己甲素的研究，虽然获得高纯度的汉防己甲素和乙素产品，但在分离过程中大量使用树脂和有毒试剂，并且获得有效成分的得率低，因此在生产过程中无法规模化应用。公开号为CN102382119A的专利公开了一种汉防已甲素和汉防已乙素的提取方法，将汉防已粉末与生石灰粉混匀，采用醇提得到总生物碱浸膏，调pH至2～4后萃取，静置分层；其中的萃取液经碱化还原，得到的萃取物用丙酮溶解，经过滤、浓缩析晶，得到汉防已甲素粗品再重结晶，得到汉防已甲素产品；将静置后的酸性水溶液调pH9～11，萃取后将得到的萃取物用丙酮溶解，经过滤、浓缩析晶，得到汉防已乙素粗品再重结晶，得到汉防已乙素产品。该法有效地避免了使用有毒试剂和树脂纯化，由于在原材料处理过程中，直接使用生石灰进行碱化处理，严重影响了防已根中淀粉对其生物碱的溶出，直接导致了生物碱的收率低下，同时增加了后期废水处理的难度。

发明内容

针对现有防已提取率不高、提取过程中产生大量废水等问题，本发明提供一种从防已中提取防已甲素和防已乙素的方法，能有效提高防已生物碱的收率，降低废水处理的难度，提高防已资源的利用率。

其具体步骤如下：

(1)干防已根粉碎，加入水至含水量达到30％～50％，加入枯草芽孢杆菌发酵2～3天，再加入酵母菌发酵2～3天，加60～80％乙醇溶液回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，滤液在55℃～65℃减压浓缩至原有体积的1/10～/40得浓缩液；

(2)向浓缩液加入0.1mol/L盐酸至pH2.5～3，用两至四倍体积的丁醇进行萃取，得水相A和丁醇萃取液A；

(3)向丁醇萃取液A加入0.01mol/L氢氧化钠溶液至pH9～10，静置分层得溶液C(不含丁醇)，用0.1mol/L盐酸至pH2.5～3，用两至四倍体积的丁醇进行萃取，得丁醇萃取液B；

(4)将丁醇萃取液B在50～65℃下减压浓缩至干，得干燥物A，再向其中加入1mol/L碳酸钠溶液进行溶解，过滤，加入乙醇至终浓度为60～70％，进行结晶得防已甲素；

(5)取水相A，加入0.01mol/L氢氧化钠溶液至pH9～10，用两至四倍体积的丁醇进行萃取，得丁醇萃取液D，

(6)将丁醇萃取液D在50～65℃下减压浓缩至干，得干燥物B，再向其中加入0.5～1mol/L碳酸钠溶液进行溶解，过滤，加入乙醇至终浓度为50～60％，进行结晶得防已乙素。