[发明专利]基因重组胶原样肽MJLGG-34及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种基因重组胶原样肽MJLGG‑34及其制备方法与应用，属于基因工程技术领域。通过基因重组得到的胶原样肽MJLGG‑34，与天然胶原蛋白相比，分子量小容易制备，生物活性稳定，具有更好的透皮率和更高的生物活性，在保证生物活性的同时皮肤更易吸收；其生物相容性和生物安全性均佳，具有良好的抗氧化、抗凋亡、抑制黑色素生成等生物活性，可显著抑制皮肤的氧化损伤、调节黑色素的生成及抵抗衰老，且无明显的毒副作用；可用于食品、保健品、化妆品等，应用范围广泛，具有良好的应用价值和产业化前景。本发明的制备方法安全、生产效率高，生产成本低，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，特别涉及一种基因重组人胶原样肽MJLGG-34及其制备方法与应用。

背景技术

胶原蛋白是很多动物体内含量最丰富的蛋白质，有着丰富的多样性和组织分布的特异性。胶原蛋白的类型、质量以及分布的改变直接影响动物体正常的机能，且其具有良好的生物相容性、低免疫原性和可生物降解性等优良特性，在生物医药、组织工程、食品、化妆品等领域有着广泛的应用。目前已经有研究表明胶原蛋白是改善皮肤水分含量的功能因子，不仅能够补充合成胶原所需要的氨基酸，也能起到修补受损细胞作用，改善细胞的营养状况和微环境，从而令肌肤重新焕发青春。

动物体内的胶原蛋白以胶原原纤维或胶原纤维的形式存在。其基本结构单位是原胶原分子，长度约为300nm，直径约为1.5nm，分子量约为300KDa，由三股相互缠绕的多肽链组成。在电子显微镜下，胶原纤维呈现特有的横纹区带，区带间距为60～70nm，这取决于胶原的类型和生物来源。原胶原蛋白分子在胶原纤维中有规则地按四分之一错位，首尾相接，并排列组成纤维束。

由于胶原属于大分子化合物，需在体内代谢为小分子短肽而发挥作用，利用特异性胶原蛋白酶剪切胶原蛋白肽链可以得到保有胶原蛋白生物活性并有与人体皮肤结构生物相容性高的寡肽，可添加至化妆品作为有效成分。通过特定的氨基酸替代和改变产生各种肽类似物，能够精确调节潜在疗法的效力，溶解度，毒性和成本。对于大多数其他分子和生物化合物来说，这种可及性和控制不易实现。

胶原蛋白生产主要有一下三大类：传统提取法、化学合成法及现代生物技术生产法。传统提取的胶原含有一定的免疫原性，增加了其应用的潜在风险，化学合成法在合成过程中外消旋作用及有毒试剂的使用导致明显的健康和环境问题，而重组蛋白具有可加工性、排异性低、无病毒隐患等特点。这些都预示着基因重组小分子胶原样肽有良好的应用价值和产业化前景。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种基因重组胶原样肽MJLGG-34。该胶原样肽MJLGG-34具有更好的透皮率和更高的生物活性。

本发明的另一目的在于提供所述基因重组胶原样肽MJLGG-34的制备方法。该制备方法根据胶原样肽MJLGG-34的氨基酸序列及大肠杆菌密码子的偏好性，设计MJLGG-34在原核表达系统的基因序列，采用基因工程技术，结合蛋白内含肽(intein)的可诱导剪切功能实现目的多肽MJLGG-34的高效制备；该制备方法安全、生产效率高，生产成本低。

本发明的再一目的在于提供所述基因重组胶原样肽MJLGG-34的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：