[发明专利]一种同时检测甲型和乙型流感病毒的试纸条及制备方法

说明书

一种同时检测甲型和乙型流感病毒的时间分辨荧光免疫层析试纸条及制备方法，该试纸条包括底板以及依次黏贴在底板上的样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，结合垫上包被有时间分辨荧光微球标记的甲型和乙型流感病毒单克隆检测抗体，反应膜包括平行设置且相互间隔的第一检测区、第二检测区和对照区，第一检测区靠近结合垫，对照区靠近吸水垫，第二检测区位于第一检测区和对照区中间，第一检测区、第二检测区和对照区分别包被有识别单一抗原表位的甲型和乙型流感病毒单克隆捕获抗体和羊抗鼠IgG抗体。本发明的同时检测甲型和乙型流感病毒的时间分辨荧光免疫层析试纸条灵敏度高，操作简单，成本低，检测时间短，其能够有效满足临床快速检验的需求。

技术领域

本发明涉及医学检验技术，特别是涉及一种同时检测甲型和乙型流感病毒的时间分辨荧光免疫层析试纸条及制备方法。

背景技术

流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染，是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是：急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期，所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起，可分为甲、乙、丙三型，其中甲型所引起的流感流行最为广泛和严重，乙型常引起爆发，丙型则多引起小儿散发病型。甲型病毒经常发生抗原变异，传染性大，传播迅速，极易发生大范围流行。感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡。甲型流感病毒中至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有：H1N1、H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2和H10N8，其中H1、H5、H7、H9为高致病性。乙型型流感病毒是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是：急起高热、全身疼痛、显着乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期，可引起局部爆发流行，但不会引起世界性流感大流行。

传统的甲型流感病毒和乙型流感病毒的检测方法主要有：

a、荧光PCR法--该方法对模板RNA质量要求高，检测灵敏度高，但是但需要专门实验室，检测仪器昂贵，检测时间也较长；，检测灵敏度高；

b、金标法---该法具有快速简便，易观察的特点，但是灵敏度不高；

c、病毒分离法---该方法准确，周期长，操作需要专门实验室；

d、酶联免疫法---该方法准确，灵敏度高，但是操作复杂，周期长。荧光免疫层析检测技术具有安全、费用低、操作简便、可实现床旁快速检测等优点，其中，时间分辨荧光免疫层析无放射性污染、无背景荧光干扰，其原理为：利用时间分辨荧光微球的荧光强度实现对待测物的定量检测。该方法作为POCT发展的新方向之一，其具备的检测结果准确度高、灵敏性好特点，能够满足临床床旁快速检测和基层社区医院的需要,成为目前的研究热点，在临床检测中具有广阔的发展前景。

POCT每一个测试单元都是独立的，因此无法保证每个测试单元质量都是一样。基于免疫层析试纸条和仪器都会因温度、湿度和pH值的不同，影响检测结果。部分POCT仪器方法学的缺陷，灵敏性和重复性欠佳，线性范围窄，只是急诊或者急求时用于参考，必要时还需送到检验科进行复查。

发明内容

本发明的主要目的在于克服现有技术的不足，提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的甲型和乙型流感病毒时间分辨免疫荧光层析试纸条，使其能够满足临床快速检验的需求。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：