[发明专利]一种检测人细小病毒IgM抗体的试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测人细小病毒IgM抗体的试剂盒，包括B19‑IgM磁微粒混悬液、磁微粒B19‑IgM酶结合物、磁微粒B19‑IgM样品稀释液、磁微粒B19‑IgM校准品、发光底物及浓缩洗液；其中B19‑IgM磁微粒混悬液中的固相载体为羧基化粒径为0.05‑1um磁微粒，包被抗体为鼠抗人IgMμ链单克隆抗体；所述磁微粒B19‑IgM酶结合物的酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的基因重组抗原。本发明试剂盒可利用全自动化学发光分析仪对样本进行检测分析，具有操作简便、检测时间短、检测结果准确、检测线性范围宽等优点。

技术领域

本发明涉及体外诊断免疫检测技术，尤其是涉及一种检测人细小病毒IgM抗体的试剂盒。

背景技术

人类细小病毒B19（HPVB19）是线性单链DNA病毒，基因组大小为 5.6kb，归类为细小病毒亚科红病毒属。血液制品、2-7岁的儿童是HPV B19 病毒的主要传染源，呼吸道、血制品及母婴垂直传播是其常见的传播途径。HPV B19感染遍布全球，根据年龄和地域分布，感染率并不相同。大约有15%的学前儿童，50%成年人和85%老年人血清学阳性。HPV B19一般引起自限性疾病，感染症状因宿主的免疫功能及血液学体质的不同而异。感染儿童最典型的症状是传染性红斑(第五病)；成人B19感染最常见的症状是关节炎和关节痛；孕妇感染 B19会导致胎儿水肿及胎儿贫血，严重时可导致流产，HPV B19被认为是仅次于HCMV的宫内感染最主要的病原之体一；对于免疫缺陷病人，如艾滋病患者、接受化疗或器官移植手术的癌症病人，因感染B19后不能产生中和抗体而导致慢性贫血，短暂的再生障碍性危象以及急性淋巴白血病等严重疾病，严重时可导致死亡。

抗体检测是目前临床诊断及流行病学调查B19感染的主要方法，检测方法主要有ELISA和胶体金，其不足之处有以下几点：1、手工操作，加样不精确；操作时间长、过程繁琐，易发生操作差错；这些误差和差错均会影响检测结果的准确度和精密度。2、检测过程处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染，进而影响检测结果的准确性。3、方法学上胶体金分析灵敏度低，肉眼判读结果也存在人为误差。4、皆为定性产品，线性范围窄；定性产品用一个简单的颜色反应点来判定结果，容易产生假阳性或假阴性结果。

研究发现，由于妊娠期发生初次感染或复发感染，体内产生IgM 或IgG 是一个急剧变化的过程，只有通过定量分析浓度变化才能检测到，且定量分析也有助于发现假阳性或假阴性结果，所以定量分析是TORCH筛查的最佳选择。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用化学发光法来检测人细小病毒IgM抗体的试剂盒, 该试剂盒可定量检测B19-IgM抗体水平，应用于IgM抗体水平的动态监测。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的检测人细小病毒IgM抗体的试剂盒，包括B19-IgM磁微粒混悬液、磁微粒B19-IgM酶结合物、磁微粒B19-IgM样品稀释液、磁微粒B19-IgM校准品、发光底物及浓缩洗液；其中B19-IgM磁微粒混悬液中的固相载体为羧基化粒径为0.05-1um磁微粒，包被抗体为鼠抗人IgM μ链单克隆抗体；所述磁微粒B19-IgM酶结合物的酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的基因重组抗原。

所述B19-IgM磁微粒混悬液中的封保液为PH7～8的PBS缓冲液，其中含有防腐剂、蛋白质类稳定剂、表面活性剂和甘油。

所述磁微粒B19-IgM样品稀释液为PH7～8的Tris缓冲液，其中含有防腐剂、蛋白质类稳定剂及表面活性剂。

所述磁微粒B19-IgM校准品由B19-IgM高值阳性稀释配制的在0～240AU/mL之间的6个不同浓度点；所述磁微粒B19-IgM校准品也可由B19-IgM高值阳性稀释配制的在0～120AU/mL之间的6个不同浓度点；所用的校准品稀释液为PH7～8的Tris缓冲液，其中含有防腐剂，蛋白质类稳定剂和表面活性剂。