[发明专利]茶花粉分离蛋白的制备方法

权利要求书

1.一种茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取茶花粉，脱脂处理；

(2)取步骤(1)脱脂茶花粉，破壁处理得到花粉溶液；

(3)向步骤(2)得到的花粉溶液中，加入去离子水调整固液比为1:20-80，调节pH至7.5-12，恒温搅拌，离心取上清液；

(4)调节步骤(3)收集的上清液pH至3.0-5.0，离心分离出蛋白，洗涤后将蛋白液pH调至7.0，冷冻干燥得茶花粉蛋白。

2.根据权利要求1所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述破壁处理采用超声波破壁处理、温差破壁处理和酶解破壁处理中的一种或者多种方式进行。

3.根据权利要求2所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述破壁处理采用酶解-超声复合破壁处理。

4.根据权利要求2所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述超声波破壁处理是指：取茶花粉，以1：6-16固液比分散在去离子水中，搅拌溶解，然后使用超声波细胞粉碎机对其进行处理；超声波细胞粉碎机处理条件为：超声强度200-600w，超声时间5-40分钟，超声开时间0-5秒，超声关时间0-5秒。

5.根据权利要求2所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述温差破壁处理是指：取茶花粉，放于零下4-零下80℃冷冻0-48h，然后以料液比1：6-16加入50-100℃热水，搅拌溶解，然后放入25-90℃水浴锅里水浴1-12h。

6.根据权利要求2所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述酶解破壁处理是指：取茶花粉，以1：6-16固液比分散在去离子水中，搅拌溶解，调整pH为2.0-6.0，加入复合酶，25-65℃酶解，酶解完成后放入60-100℃水浴锅中2-20分钟使酶失活。

7.根据权利要求6所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，所述复合酶组成为纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶和木瓜蛋白酶。

8.根据权利要求1所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述恒温搅拌是指在25-75℃的恒温水浴锅中搅拌10-100分钟；所述离心是指用离心机以2500-5000rpm/min的转速离心5-30分钟。

9.根据权利要求1所述的茶花粉分离蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述离心是指2500-5000rpm/min离心5-30分钟。