[发明专利]一种淋巴结组织切片的制作方法有效
申请号: | 201811524349.X | 申请日: | 2018-12-13 |
公开(公告)号: | CN109580306B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 王宽松;粟诗童;郭伟;杨芝春;周建华;傅春燕;谢斌;禹灿平 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人: | 钱朝辉 |
地址: | 410083 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 淋巴结 组织 切片 制作方法 | ||
1.一种淋巴结组织切片的制作方法,所述淋巴结周围和内部附有脂肪组织,包括以下步骤:将淋巴结组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色,其特征在于,在固定与脱水步骤之间还包括以下步骤:将淋巴结组织用碱性溶液处理;将固定后的淋巴结组织放入60-70℃碱性溶液中浸泡5-20min;所述碱性溶液中含有缓冲液、保护液,所述缓冲液为磷酸缓冲盐溶液,所述保护液为聚乙二醇;
所述碱性溶液由弱碱或强碱弱酸盐配制而成,所述碱性溶液中氢氧根离子的量以保证淋巴结周围和内部所附脂肪组织中脂滴全部反应为准。
2.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于,所述固定时,淋巴结组织在手术离体30min内进行如下操作:将直径大于5mm的淋巴结组织对剖后放入脱水盒内,直径小于1mm的淋巴结组织用擦镜纸包裹后放入脱水盒内,再将脱水盒放入中性福尔马林固定液中浸泡,浸泡时间为8-12h。
3.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于,所述包埋时,使用熔点为62℃与58℃两种规格的石蜡按(1-3):1体积混合后反复冻融,使混合石蜡中的杂质析出得到纯净石蜡,再用纯净石蜡包埋淋巴结组织。
4.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于,所述切片前,先将包埋好的蜡块充分冷冻,冷冻时间大于2h,冷冻温度为-20℃。
5.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于,所述切片后,将切出的石蜡片放入乙醇-水溶液中摊片,再采用防脱载玻片裱片,所述乙醇-水溶液是指室温水溶液中滴加2-3滴75%的乙醇。
6.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于,所述染色前,先将切片放于65℃烤箱内烤片30-40min。
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