[发明专利]一种淋巴结组织切片的制作方法

说明书

本发明公开了一种淋巴结组织切片的制作方法，所述淋巴结组织周围和/或内部附带有脂肪组织，包括以下步骤：将淋巴结组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色，在固定与脱水之间还包括以下步骤：将淋巴结组织用碱性溶液处理。本发明采用碱性溶液处理淋巴结组织，可去除脂肪细胞中脂滴，使脂肪组织与淋巴组织达到相同脱水效果，从而完整连续成片。另外，采用本发明方法处理淋巴结内部的脂肪化生区域，可避免切片时产生“空洞”现象，以获得高质量切片。

技术领域

本发明属于病理组织切片制备技术领域，尤其涉及一种淋巴结组织切片的制作方法。

背景技术

癌症患者的淋巴结病理检查是外科病理的日常工作之一。大量研究表明，淋巴结是否存在癌转移与癌症患者的预后密切相关，但目前淋巴结组织病检的误诊率却高达10％-30％，其主要原因是淋巴结切片不完整。由于外周脂肪或淋巴结内部脂肪化生区域与淋巴组织的脱水效果不同，导致淋巴结与脂肪组织脱水后硬度不一致，切片时无法完整成片。

制作淋巴结组织切片时，淋巴结外周脂肪对切片制作有较大影响，脂肪组织会阻碍试剂与淋巴结充分接触，导致淋巴结固定、脱水不充分，并且脂肪细胞中存在脂滴，也使得脂肪组织本身固定及脱水不充分。而剔除脂肪不仅耗时，并且有可能破坏淋巴结组织解剖学结构完整性或造成较小淋巴结的丢失，从而无法精准判断淋巴结数量以及其周围脂肪、脉管内有无肿瘤细胞侵犯，丢失大量有价值的临床信息。目前所报道的相关病理技术还未能很好的解决上述临床问题。

发明内容

本发明所要解决的临床问题是以上背景技术中提到的淋巴结组织制片这一病理技术难题，提供一种高质量的淋巴结组织切片制作方法，该方法能够保护淋巴结及其周围脂肪组织的完整性，保留淋巴结组织解剖学结构特点，从而获得更多有价值的临床信息。为克服上述技术难题，本发明提出的技术方案为：

一种淋巴结组织切片的制作方法，所述淋巴结组织周围和/或内部附带有脂肪组织，包括以下步骤：将淋巴结组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色，在固定与脱水之间还包括以下步骤：将淋巴结组织用碱性溶液处理。

本发明中，淋巴结周围脂肪组织没有被剔除，剔除脂肪后会破坏淋巴结组织解剖学结构完整性，使其周围脂肪组织和伴行脉管丢失，无法精准判断淋巴结周围脂肪组织及伴行脉管内有无肿瘤侵犯，损失大量临床信息，造成不必要的误诊、漏诊，不剔除淋巴结周围脂肪组织有助于保护淋巴结组织解剖学结构完整性，使病理诊断更加精准。

上述制作方法中，优选的，将淋巴结组织用碱性溶液处理包括以下步骤：将固定后的淋巴结组织放入60-70℃碱性溶液中浸泡5-20min。

上述制作方法中，优选的，所述碱性溶液由强碱、弱碱或强碱弱酸盐配制而成，所述碱性溶液中氢氧根离子的量以保证淋巴结周围和内部所附脂肪组织中脂滴全部反应为准，即保证脂滴全部与碱性溶液中的氢氧根离子反应。优选的，所述碱性溶液由弱碱或强碱弱酸盐配制而成。碱在选用时，理论上只要能提供与脂滴反应的氢氧根离子即可，但弱碱或强碱弱酸盐提供的碱性环境更加柔和，对组织伤害甚微，选择弱碱或强碱弱酸盐较合适。进一步优选的，采用过饱和的碳酸钠溶液配制碱性溶液。

上述制作方法中，更优选的，碱性溶液中，控制碱性溶液的pH值为11-14。

上述制作方法中，优选的，所述碱性溶液中含有缓冲液、保护液，所述缓冲液为磷酸缓冲盐溶液，所述保护液为聚乙二醇，所述缓冲液的浓度为0.01-4mol/L，所述保护液的浓度为0.01-4mol/L。