[发明专利]一种甘露糖固定化细胞的方法

权利要求书

1.一种甘露糖固定化细胞的方法，其特征在于，该方法以甘露糖磁性纳米颗粒作为固定材料，将悬浮液浓度为4.5～25.5mg/mL的大肠杆菌细胞悬浮液在温度为4～50℃的条件下加入缓冲液后进行反应0.25～3h。

2.根据权利要求1所述的一种甘露糖固定化细胞的方法，其特征在于，所述的缓冲液为pH为6.0-8.0的磷酸盐缓冲液、pH为9.0的Tris-HCl缓冲液或pH为10.0-11.0的甘氨酸-NaOH缓冲液中的一种。

3.根据权利要求2所述的一种甘露糖固定化细胞的方法，其特征在于，所述的缓冲液为pH为6.0-8.0的磷酸盐缓冲液的盐浓度为10～250mM。

4.根据权利要求1所述的一种甘露糖固定化细胞的方法，其特征在于，所述的甘露糖磁性纳米颗粒的制备方法如下：所述的甘露糖磁性纳米颗粒的制备方法如下：

(1)将FeSO₄·4H₂O和FeCl₃·6H₂O按照摩尔比1：3溶于蒸馏水中，然后转移至三颈圆底烧瓶中，在80℃，搅拌和氮气保护条件下，迅速加入40％的NH₄OH调节溶液至碱性，反应5min后，加入油酸，再搅拌反应25min后，获得的黑色沉淀用无水乙醇和超纯水反复清洗至上清液无色透明，强磁铁沉淀分离，于真空烘箱中烘干，得到油酸磁性纳米颗粒；

(2)称取一定量的多巴胺盐酸盐溶解于缓冲溶液中，配制成3mg/mL的多巴胺盐酸溶液，将步骤(1)制备的油酸磁性纳米颗粒研磨均匀加入到多巴胺盐酸溶液中，超声15min，然后置空气中搅拌8h，搅拌结束后，用磁铁分离，获得的深棕色沉淀用乙醇和蒸馏水清洗，于真空烘箱中烘干，得到磁性纳米颗粒称为多巴胺功能化磁性纳米载体；

(3)称取一定量的甘露糖胺盐溶解于缓冲溶液中，配制成3mg/mL的甘露糖胺盐溶液，将步骤(2)制备的多巴胺功能化磁性纳米颗粒研磨均匀加入到甘露糖胺盐溶液中，然后置空气中搅拌5h，搅拌结束后，用磁铁分离，获得的黑色沉淀用乙醇和蒸馏水清洗，于真空烘箱中烘干，得到磁性纳米颗粒称为甘露糖磁性纳米载体。