[发明专利]TEV蛋白酶变体、其融合蛋白及制备方法和用途有效
| 申请号： | 201811540443.4 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN111019926B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 刘日魁;邹晓龙;万江华 | 申请（专利权）人： | 上饶市康可得生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/50 | 分类号： | C12N9/50;C07K19/00;C12N15/57;C12N15/62;C07K14/695 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 贾静环 |
| 地址： | 334100 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | tev 蛋白酶 变体 融合 蛋白 制备 方法 用途 | ||
1.TEV蛋白酶变体，其由以SEQ ID NO:4、5或6所示的氨基酸序列组成。
2.融合蛋白，其包含根据权利要求1所述的TEV蛋白酶变体。
3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其包含结构TEVp-sTEV-Y1，
其中Y1为感兴趣的多肽；
TEVp为根据权利要求1所述的TEV蛋白酶变体；
sTEV为TEV蛋白酶酶切位点，其是EXXYXQG/S/H，其中X为任意氨基酸残基。
4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其中所述酶切位点选自SEQ ID NO:7和8。
5.根据权利要求3或4所述的融合蛋白，其中感兴趣的多肽选自ACTH、GLP-1/GLP-2、IFN-α、IFN-γ、Histatin、CCL5、SDF-1α、IGF-1、Leptin、BNP或Ex-4。
6.根据权利要求5所述的融合蛋白，其中感兴趣的多肽是ACTH。
7.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中ACTH是人ACTH。
8.根据权利要求5所述的融合蛋白，其中ACTH是以SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的人ACTH。
9.根据权利要求3-8中任一项所述的融合蛋白，其中TEVp与sTEV是直接连接的或者相隔一个或多个氨基酸残基，条件是TEVp能识别并切割sTEV。
10.根据权利要求3-8中任一项所述的融合蛋白，其中sTEV与Y1是直接连接的或者相隔一个或多个氨基酸残基，条件是TEVp能识别并切割sTEV。
11.根据权利要求10所述的融合蛋白，其中sTEV与Y1是直接连接的。
12.根据权利要求2-8中任一项所述的融合蛋白，其还包含标签。
13.根据权利要求12所述的融合蛋白，其中所述标签为纯化标签。
14.根据权利要求12所述的融合蛋白，其中所述标签选自下组：His标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)标签、谷胱甘肽转移酶(GST)标签、NusA标签、SUMO标签、Avi标签、T7标签、S标签、Flag标签、HA标签、c-myc标签、或Strep II标签。
15.根据权利要求12所述的融合蛋白，其中所述标签在融合蛋白的N端。
16.根据权利要求3的融合蛋白，其中TEVp的N端无标签。
17.编码根据权利要求1所述的TEV蛋白酶变体或根据权利要求2-16中任一项所述的融合蛋白的多核苷酸。
18.根据权利要求17所述的多核苷酸，其选自SEQ ID NO.14-16。
19.多核苷酸构建体，其包含根据权利要求17或18所述的多核苷酸。
20.表达载体，其包含根据权利要求17或18所述的多核苷酸序列或权利要求19所述的多核苷酸构建体。
21.根据权利要求20所述的表达载体，其中所述表达载体为真核生物表达载体或原核生物表达载体。
22.根据权利要求21所述的表达载体，其为真核生物表达载体。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上饶市康可得生物科技有限公司，未经上饶市康可得生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811540443.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
