[发明专利]一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用

权利要求书

1.一株赤红球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01，其保藏编号为CGMCC NO.16640。

2.含有权利要求1所述的赤红球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01的菌剂。

3.含有权利要求1所述的赤红球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01的组合物。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，其为免疫佐剂、保健品或疫苗。

5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述疫苗为动物用油乳剂疫苗。

6.如权利要求3-5任一所述的组合物，其特征在于，赤红球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01在疫苗中的菌体干重浓度为0.025-0.75mg/mL。

7.权利要求1所述的赤红球菌在制备巨噬细胞诱导刺激剂中的应用。

8.一种将赤红球菌制作为免疫佐剂的方法，包括以下步骤：

(1)将保藏编号为CGMCC NO.16640的赤红球菌RDC-01活化后接种至摇瓶培养基中，30～37℃振荡培养至对数生长后期，收集摇瓶菌种；

(2)将摇瓶菌种接种至种子培养基中，30～37℃培养至对数生长期，得种子液；所述种子培养基为：蛋白胨15g/L，酵母粉15g/L，NaCl 10g/L，葡萄糖15g/L，NH₄SO₄ 2g/L，pH7.0-7.5；

(3)将所述种子液接种至发酵培养基中，30～37℃发酵完成后，离心收集沉淀，用生理盐水或注射用水冲洗沉淀三次后，离心收集沉淀；发酵培养基同种子培养基；

(4)将步骤(3)中收集的沉淀高压灭菌，即得。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，培养温度为30℃，培养基的pH为7.3；

步骤(3)中，培养温度为30℃。

10.一种动物用油乳剂灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)佐剂液的制备：取权利要求1所述的赤红球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01高压灭菌处理后，溶于无菌生理盐水中制备成菌体干重浓度为10-100mg/mL的佐剂液；

(2)抗原水相的制备：取80-98体积份的灭菌抗原，无菌条件下添加1-10体积份的佐剂液，再加入2-8体积份灭菌的吐温80，至吐温80完全溶解后得到抗原水相；所述抗原水相中赤红球菌的浓度为0.1-1.0mg/mL；

(3)疫苗的制备：抗原水相与灭菌油相的体积比为1:1.5-1:3混合进行乳化，制备得到油乳剂灭活疫苗。