[发明专利]一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用

说明书

本发明公开了一株赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用。本发明的赤红球菌也称为红色红球菌(Rhodococcus ruber)RDC‑01，保藏编号为CGMCC NO.16640，该菌具有提高调节机体免疫的功能，可非特异增强TB淋巴细胞、巨噬细胞，NK细胞的活性，诱生干扰素等多种细胞因子，将该菌灭活后作为免疫佐剂添加入油乳剂灭活疫苗中可以明显促进疫苗诱导动物抗体产生，与单独使用油乳剂灭活疫苗相比，能够产生高滴度的抗体，使用安全，无短期及长期的毒副作用，在动物用疫苗制备领域应用前景良好。

技术领域

本发明属于微生物学与免疫学领域，具体地说，涉及一种赤红球菌及其作为免疫佐剂在制备疫苗中的应用。

背景技术

禽用各类传染病的灭活疫苗，对防控这些疫病发挥了重要作用。使用灭活疫苗希望能够达到消除性免疫，即在接受某种疫苗免疫后，完全保护机体受此类疫病的感染发病，或者在感染后不排毒，不将病毒传播给其它动物。但现有灭活疫苗免疫机体后抗体产生较慢，抗体持续期较短，抗体水平整齐度差。为了使抗体水平整齐度较好，一方面，一般需要多次免疫，维持较高的抗体水平；另一方面，禽用灭活疫苗在配制时需要进行抗原浓缩，以保证疫苗中的抗原含量和疫苗的免疫效果。这些措施都增加了疫苗的生产成本，因此，研究开发安全、高效、经济的禽用油乳剂灭活疫苗专用免疫佐剂成为研究热点。

免疫佐剂就是指先于抗原或与抗原同时应用，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型，而本身无抗原性的物质，又称免疫佐剂或抗原佐剂。常用的免疫佐剂有灭活的分岐杆菌(如卡介苗和结核杆菌等)、细胞因子、双链聚肌苷酸、铝胶佐剂及矿物油佐剂等。目前免疫佐剂普遍存在以下问题：(1)灭活的结核杆菌佐剂，由于自然的结核分岐杆菌具有高毒力，对人和动物有致病性。目前都是采用减毒的卡介苗制备佐剂，但是仍然存在后续处理要求高，容易造成灭活不彻底导致作为佐剂应用是引发高度的动物健康危险性，此外在注射部位会引起强烈的炎症和溃疡，使用受到限制。(2)细胞因子具有调整和重建免疫应答的能力，但价格较为昂贵，不适用于动物疫苗。(3)双链聚肌苷酸(聚肌胞)是一种人工合成的双链核糖核酸，是一种干扰素诱导剂，有抗病毒和免疫调节功能，但是鉴于其半衰期短，体内呈一过性反应，其作为禽用油乳剂灭活疫苗免疫佐剂的效用仍不明确。(4)铝胶佐剂是目前动物疫苗常用佐剂，其主要问题是：①主要激活Th2型免疫细胞，只诱导体液免疫应答，适用于以抗体保护为主的疾病疫苗；②铝胶佐剂在注射部位缓慢释放抗原的效应较低，对很多抗原效果不确实。

综上所述，目前常用的疫苗佐剂，由于局部刺激强烈、诱导免疫应答差等诸多缺点，限制了其应用。因此，开发新一代高效、低毒、廉价的疫苗佐剂用于改善动物免疫效果变得十分迫切，成为畜禽养殖业亟待解决的重要问题。

赤红球菌(Rhodococcus rubber)是降解苯酚的专性菌，对原油中苯酚、烃类及芳烃类化合物具有较高的降解作用，现有技术常利用赤红球菌的特性降解废水中的有机污染物，促进污染环境的改善，保护生态环境。赤红球菌在除了环境治污方面的应用有广泛的报道外，未有其他应用的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有调节机体免疫功能，高免疫刺激力的赤红球菌在作为免疫佐剂方面的用途。

为了实现本发明的目的，本发明的赤红球菌(Rhodococcus rubber)RDC-01是从广州市番禺区附近郊野红土中筛选到的。经16S rRNA基因序列分析和培养特性鉴定，该菌株为赤红球菌也称为红色红球菌。该菌株已于2018年10月30日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为赤红球菌(Rhodococcus rubber)，保藏号为CGMCCNo.16640。